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zhejiahuo1铁虫 (小有名气)
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急急急！巢式PCR，第二轮产物跑胶点样孔有亮带，似有东西跑不出
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| 大家有谁了解或是做过巢式PCR？我把第一轮的产物和第二轮的产物进行0.8%琼脂糖凝胶电泳，第二轮产物点样孔里有亮带，好像是有东西跑不出，将第二轮产物稀释10倍时亮度减弱，稀释100倍时就更弱了，但依然跑不出东西。其实之前做了好多次，相同的引物相同的模板就没有这个问题，自从新买了酶以后，就有了这个问题了。用了分装好未开封的引物，也重提了模板，还是不行，我做了酶的对比，换了别人的酶，，有时别人的酶会有这种问题有时又不会，。做的我头都大了，不知如何是好！如果说是PCR程序的问题，我之前都做的好好的，没有什么问题啊，大家有谁遇到过，快来帮我解答下或是分析分析，先谢过了！！！！！！！！！！ |
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