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zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)

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[求助] 急急急！巢式PCR，第二轮产物跑胶点样孔有亮带，似有东西跑不出

大家有谁了解或是做过巢式PCR？我把第一轮的产物和第二轮的产物进行0.8%琼脂糖凝胶电泳，第二轮产物点样孔里有亮带，好像是有东西跑不出，将第二轮产物稀释10倍时亮度减弱，稀释100倍时就更弱了，但依然跑不出东西。其实之前做了好多次，相同的引物相同的模板就没有这个问题，自从新买了酶以后，就有了这个问题了。用了分装好未开封的引物，也重提了模板，还是不行，我做了酶的对比，换了别人的酶，，有时别人的酶会有这种问题有时又不会，。做的我头都大了，不知如何是好！如果说是PCR程序的问题，我之前都做的好好的，没有什么问题啊，大家有谁遇到过，快来帮我解答下或是分析分析，先谢过了！！！！！！！！！！

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1楼 2012-06-17 07:26:46

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fiafiafiaaaa

铁虫 (初入文坛)

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专业: 植物化学保护

楼主您好，我现在也是遇到这样的问题，能不能添加您的联系方式，具体请教您。

8楼2019-07-11 16:57:43

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