24小时热门版块排行榜    

查看: 6141  |  回复: 30

wuwo

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物跑胶时加样孔很亮 已有21人参与

PCR产物跑胶时加样孔很亮,下面只有二聚体无目的条带,Marker正常,绝不是蛋白污染(基因组梯度稀释做过仍是,同样基因组用另一引物P的结果加样孔正常,PCR产物测DNA结果有339ng/μL,应该是P出的产物),相应条件另一酶的PCR结果正常,换了个酶后一直P出加样孔很亮,下面只有二聚体无目的带,模板梯度做了有原浓度到稀释10000倍都是,可能是哪些原因呢?


多谢各位朋友,胶浓度是1%的,Marker是5k,目的条带应该在4k
上图

[ Last edited by wuwo on 2010-7-13 at 19:23 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wuwo

铜虫 (小有名气)

问题已解决,降低了一点退火温度,就ok了,回复里面比较有意义的我逐一赠金币,多谢大家出谋划策,谢谢!
21楼2010-07-20 10:03:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Z L N

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
26楼: Originally posted by DDDAXZ at 2014-05-21 23:35:47
你好,请问你这个问题解决了吗?我最近就出现这种问题,用的也是primestar这种酶,难道是这个酶放的时间长了?

你好  我也遇到了相同的问题   急求答案  不胜感激。
29楼2015-11-09 10:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)

建议附图
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
2楼2010-06-14 00:36:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaozx123

金虫 (小有名气)

楼主上图啊,不知你的目的片段多大,用多大的胶浓度啊?
3楼2010-06-14 08:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)

有图有真相
4楼2010-06-14 11:45:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wordsworth3180

木虫 (正式写手)

胶浓度多少?
5楼2010-06-14 12:27:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwo

铜虫 (小有名气)

多谢各位朋友,刚刚才把图上去,多谢各位能帮出出点子。
6楼2010-07-13 19:24:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhucexiaji

金虫 (小有名气)

看这个图,如果胶浓度没问题的话,十有八九是蛋白的缘故
7楼2010-07-13 20:41:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

是不是胶的问题?
8楼2010-07-13 21:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

样品里面蛋白浓度太大
9楼2010-07-14 09:48:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loboye0931

铜虫 (小有名气)

wuwo(金币+1):谢谢,一人一个! 2010-07-20 10:06:04
我以前也碰到过,结果发现是dNTP加错了,加成dATP了。你也检查一下试剂?还有
10楼2010-07-14 10:51:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wuwo 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 10:02 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:38 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:34 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:26 by C79jjtjAKjEn
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 05:34 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:01 by mibUvS8DDCwf
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
信息提示
请填处理意见