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wuwo

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物跑胶时加样孔很亮 已有21人参与

PCR产物跑胶时加样孔很亮,下面只有二聚体无目的条带,Marker正常,绝不是蛋白污染(基因组梯度稀释做过仍是,同样基因组用另一引物P的结果加样孔正常,PCR产物测DNA结果有339ng/μL,应该是P出的产物),相应条件另一酶的PCR结果正常,换了个酶后一直P出加样孔很亮,下面只有二聚体无目的带,模板梯度做了有原浓度到稀释10000倍都是,可能是哪些原因呢?


多谢各位朋友,胶浓度是1%的,Marker是5k,目的条带应该在4k
上图

[ Last edited by wuwo on 2010-7-13 at 19:23 ]
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wuwo

铜虫 (小有名气)

问题已解决,降低了一点退火温度,就ok了,回复里面比较有意义的我逐一赠金币,多谢大家出谋划策,谢谢!
21楼2010-07-20 10:03:24
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Z L N

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
26楼: Originally posted by DDDAXZ at 2014-05-21 23:35:47
你好,请问你这个问题解决了吗?我最近就出现这种问题,用的也是primestar这种酶,难道是这个酶放的时间长了?

你好  我也遇到了相同的问题   急求答案  不胜感激。
29楼2015-11-09 10:01:46
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普通回帖

zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)

建议附图
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
2楼2010-06-14 00:36:57
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gaozx123

金虫 (小有名气)

楼主上图啊,不知你的目的片段多大,用多大的胶浓度啊?
3楼2010-06-14 08:57:35
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张力民1598

铜虫 (小有名气)

有图有真相
4楼2010-06-14 11:45:42
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

胶浓度多少?
5楼2010-06-14 12:27:53
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wuwo

铜虫 (小有名气)

多谢各位朋友,刚刚才把图上去,多谢各位能帮出出点子。
6楼2010-07-13 19:24:43
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zhucexiaji

金虫 (小有名气)

看这个图,如果胶浓度没问题的话,十有八九是蛋白的缘故
7楼2010-07-13 20:41:59
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

是不是胶的问题?
8楼2010-07-13 21:00:20
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jqq1985

银虫 (正式写手)

样品里面蛋白浓度太大
9楼2010-07-14 09:48:21
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loboye0931

铜虫 (小有名气)

wuwo(金币+1):谢谢,一人一个! 2010-07-20 10:06:04
我以前也碰到过,结果发现是dNTP加错了,加成dATP了。你也检查一下试剂?还有
10楼2010-07-14 10:51:51
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