| 查看: 1889 | 回复: 11 | ||
stephenallan金虫 (小有名气)
|
[求助]
DGGE跑胶，为啥PCR产物一直停留在浓缩胶，没有往变性胶跑下去？？
|
|
最近在做DGGE，PCR产物一直停在点样孔下面，电泳就跑到浓缩胶底，没有再往变性胶跑。 PCR产物约在250bp. 变性胶10%gel，梯度试了两个35-55%，,55-70%，都没有成功。 电泳条件：80V，13h；300,3h；200v，5h都试了，一样没有跑下去。 想了好久，排除了一些原因，还是没有 弄明白！ 求助，这是什么原因？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有224人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 尿素胶跑DNA（PCR产物），变性不完全
已经有12人回复
- 关于蛋白质的跑胶
已经有17人回复
- 紧急求助：DGGE跑电泳时，为什么样品（pcr产物）始终集中在点样孔，跑不下去？
已经有12人回复
- 降落PCR一直 跑不出来（用于DGGE）
已经有16人回复
- 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！
已经有36人回复
- 【求助/交流】谁能介绍一下变性胶非变性胶
已经有4人回复
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-03 17:31:42
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-03 17:31:42
 没图嘛... 1、检查下你配的TAE buffer的pH值是不是正常 2、你换一下引物，引物的bp值不要太大了，199bp的就差不多了(我也不知道你的是多大的) 3、调整下上样量，往小了调，比如5μl的可以换成3μl或者2μl的 4、虽然不太可能，但是检查下你的胶有没有灌反了，从上到下是不是低到高的 5、你可以先用高电压比如240V把DNA先冲下来，然后换到差不多130-140V这样跑5-6小时 或者80过夜跑个14-15个小时这样 祝实验顺利... |
2楼2013-11-02 21:20:13
stephenallan
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1098
- 红花: 5
- 帖子: 89
- 在线: 31.8小时
- 虫号: 1865797
- 注册: 2012-06-21
- 专业: 植物资源学
3楼2013-11-02 22:15:14
stephenallan
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1098
- 红花: 5
- 帖子: 89
- 在线: 31.8小时
- 虫号: 1865797
- 注册: 2012-06-21
- 专业: 植物资源学
4楼2013-11-04 16:07:14
stephenallan
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1098
- 红花: 5
- 帖子: 89
- 在线: 31.8小时
- 虫号: 1865797
- 注册: 2012-06-21
- 专业: 植物资源学
5楼2013-11-04 16:09:40
zq347597638
新虫 (小有名气)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 284.9
- 散金: 246
- 红花: 6
- 帖子: 274
- 在线: 112.6小时
- 虫号: 1370456
- 注册: 2011-08-17
- 专业: 环境微生物学
6楼2013-11-09 09:23:21
7楼2013-11-10 17:31:25
8楼2013-11-19 13:31:00
9楼2013-11-25 17:32:36
stephenallan
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1098
- 红花: 5
- 帖子: 89
- 在线: 31.8小时
- 虫号: 1865797
- 注册: 2012-06-21
- 专业: 植物资源学
10楼2013-11-27 00:29:06