| 查看: 2339 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
stephenallan金虫 (小有名气)
|
[求助]
DGGE跑胶，为啥PCR产物一直停留在浓缩胶，没有往变性胶跑下去？？
|
|
|
最近在做DGGE，PCR产物一直停在点样孔下面，电泳就跑到浓缩胶底，没有再往变性胶跑。 PCR产物约在250bp. 变性胶10%gel，梯度试了两个35-55%，,55-70%，都没有成功。 电泳条件：80V，13h；300,3h；200v，5h都试了，一样没有跑下去。 想了好久，排除了一些原因，还是没有 弄明白！ 求助，这是什么原因？ |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有248人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 尿素胶跑DNA（PCR产物），变性不完全
已经有12人回复
- 关于蛋白质的跑胶
已经有17人回复
- 紧急求助：DGGE跑电泳时，为什么样品（pcr产物）始终集中在点样孔，跑不下去？
已经有12人回复
- 降落PCR一直 跑不出来（用于DGGE）
已经有16人回复
- 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！
已经有36人回复
- 【求助/交流】谁能介绍一下变性胶非变性胶
已经有4人回复
stephenallan
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1098
- 红花: 5
- 帖子: 89
- 在线: 31.8小时
- 虫号: 1865797
- 注册: 2012-06-21
- 专业: 植物资源学
4楼2013-11-04 16:07:14
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-03 17:31:42
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-03 17:31:42
 没图嘛... 1、检查下你配的TAE buffer的pH值是不是正常 2、你换一下引物，引物的bp值不要太大了，199bp的就差不多了(我也不知道你的是多大的) 3、调整下上样量，往小了调，比如5μl的可以换成3μl或者2μl的 4、虽然不太可能，但是检查下你的胶有没有灌反了，从上到下是不是低到高的 5、你可以先用高电压比如240V把DNA先冲下来，然后换到差不多130-140V这样跑5-6小时 或者80过夜跑个14-15个小时这样 祝实验顺利... |
2楼2013-11-02 21:20:13
stephenallan
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1098
- 红花: 5
- 帖子: 89
- 在线: 31.8小时
- 虫号: 1865797
- 注册: 2012-06-21
- 专业: 植物资源学
3楼2013-11-02 22:15:14
stephenallan
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1098
- 红花: 5
- 帖子: 89
- 在线: 31.8小时
- 虫号: 1865797
- 注册: 2012-06-21
- 专业: 植物资源学
5楼2013-11-04 16:09:40
