| 查看: 6436 | 回复: 13 | ||||
[求助]
Western Blot 目标条带跑不出来，内参条带清晰 已有5人参与
|
||||
| 各位朋友帮帮忙吧，我是新手，刚学做 western blot，内参条带到是挺清晰，也基本一致，但是我的目标蛋白一个条带都没有，这是为啥啊 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有130人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- western blot实验交流
已经有13人回复
- western blot 内参β-actin图片异常
已经有11人回复
- 请问用Western做co-ip，内参要如何设置，内参是必须的吗？
已经有3人回复
- 免疫荧光染色，western blot均有目的蛋白，但是RT-PCR总是没有条带
已经有5人回复
- western blot中古怪的非特异性条带
已经有9人回复
- Western Blot中蛋白条带信号强弱与上样体积不成正比的可能原因？
已经有3人回复
- westernblot 目标蛋白无条带
已经有9人回复
- western blot 封完抗体，目标蛋白看不到，但是看家很好是怎么回事啊
已经有23人回复
- 免疫沉淀后进行western blot 应该有几条带？
已经有16人回复
- western 内参beta-actin条带跑不出来
已经有17人回复
- Western Blot结果 条带中间 不见了，请教高手！
已经有13人回复
- western blot 条带
已经有15人回复
- western blot 显色6组里边只有一组有条带，急，求助！谢谢！
已经有4人回复
- western blot，湿转膜，不成功，急！
已经有8人回复
- western blot 转膜后只看到marker条带，看不到样本，是怎么回事？
已经有4人回复
- western blot 第一次曝光有条带，而且浓厚，第二次就没有了。。。
已经有13人回复
- RT-PCR时GAPDH能跑出来，但目的条带跑不出来~~
已经有7人回复
- sds page 跑不出条带
已经有11人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- western blot时marker问题求助
已经有18人回复
- 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
已经有19人回复
- 【求助/交流】western blot 显影后发现条带中空，求解答。
已经有8人回复
- 【求助/交流】纯化酶切后的膜蛋白做Western blot没条带，why？
已经有9人回复
- 【求助/交流】westernblot的背景怎么消除呀
已经有10人回复
- 【求助/交流】western blot 一直都跑不出来，不知道原因，大侠给分析一下啊！？
已经有13人回复
3楼2013-10-23 15:26:52
daibingling
铁虫 (正式写手)
- 应助: 120 (高中生)
- 金币: 927.7
- 散金: 200
- 红花: 5
- 帖子: 406
- 在线: 110.6小时
- 虫号: 2116850
- 注册: 2012-11-09
- 专业: 药物分析
5楼2013-10-23 17:49:09
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
【答案】应助回帖
|
一、Western Blot实验条带没出现的原因分析及解决办法 ： 原因分析 解决办法 1.一抗和二抗失效 1. 更换抗体；选择现用现配的工作液 2.一抗和二抗不匹配 2. 更换为同种同属的同亚型的抗体底物 3.发光液失效 3. 更换新的发光液 4.抗体染色不充分 4. 增加抗体浓度；延长孵育时间 5.被测样品中不含有目的蛋白质或者目的 蛋白质含量太低 5. 设置阳性对照。确定标本中是否含有目的蛋白质； 增加样品 的上样量。 6. 溶液中有辣根过氧化物酶的抑制剂 6.用透析和超滤除去所用溶液中如叠氮化钠之类的抑制剂 7.抗体活力降低 7.在抗体活力保存时间内使用抗体；工作液现用现配 二、一抗与二抗的专一性识别检测，就是蛋白质-蛋白质相互作用检测，方法很多，免疫共沉淀、Pull down、MADLI-MS、能量转移、分子筛层析等。 |
12楼2014-07-12 00:48:39
daibingling
铁虫 (正式写手)
- 应助: 120 (高中生)
- 金币: 927.7
- 散金: 200
- 红花: 5
- 帖子: 406
- 在线: 110.6小时
- 虫号: 2116850
- 注册: 2012-11-09
- 专业: 药物分析
2楼2013-10-23 15:25:24
4楼2013-10-23 15:29:44
zhangxn2010
木虫 (著名写手)
让一切随风飞翔
- MolEPI: 1
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 2450.9
- 散金: 923
- 红花: 7
- 帖子: 2880
- 在线: 284小时
- 虫号: 972619
- 注册: 2010-03-16
- 专业: 神经生物学
6楼2013-10-25 11:18:09
7楼2013-10-26 22:12:13
liujiao7952
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1380.1
- 散金: 60
- 帖子: 110
- 在线: 81.4小时
- 虫号: 2100935
- 注册: 2012-11-01
- 性别: MM
- 专业: 肝再生、肝保护、肝衰竭、
8楼2013-12-09 10:47:10
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17200.5
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14527
- 在线: 2185.6小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
9楼2013-12-09 18:04:57
10楼2014-04-24 16:05:44
