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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot，湿转膜，不成功，急！
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酿酒酵母

铜虫 (初入文坛)

[求助] western blot，湿转膜，不成功，急！

各位大侠求助，本人是个新手，做western blot，湿转后，为什么预染Marker的小条带在膜上，但大条带不在呢，胶上也没有，这是为什么呢。
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1楼 2012-08-04 00:04:08
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是电转移液少了？
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2楼2012-08-04 00:32:40
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tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电转液的问题吧，重新配置电转液试试。
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coasttocoast。
3楼2012-08-04 08:27:55
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ankang0910

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-04 20:19:31
1、电压低了？
2、时间短了？
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实验顺利！！
4楼2012-08-04 17:04:38
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xiwenhui

木虫 (正式写手)
呵呵，拿来我给你做吧！
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5楼2012-08-05 16:20:42
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84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人觉得转膜时间短了,请问是转膜时间多少呢？
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6楼2012-08-05 19:43:17
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酿酒酵母

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 84146922 at 2012-08-05 19:43:17
个人觉得转膜时间短了,请问是转膜时间多少呢？

45kD的蛋白，150mA,一小时。
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7楼2012-08-06 09:12:53
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guxinhan123

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电流可以加大，时间不用延长应该就可以
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8楼2012-08-06 12:56:41
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84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 84146922 at 2012-08-05 19:43:17
个人觉得转膜时间短了,请问是转膜时间多少呢？

你好，我在进行转膜时，30KD的蛋白，我转了两个小时，300mA,希望对你有帮助，不过注意保持低温，不要让蛋白胶烧焦了
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9楼2012-08-07 20:06:51
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