应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】转膜
161/2返回列表12下一页
查看: 1997  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yananjizhu

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】转膜 已有7人参与

大家好，我最近做180kd蛋白的westernblot，想请教下你们的转膜条件，我用的是300mA的恒流，转膜两个小时，最后显色时看见条带还可以，就是特别的淡，应该说很淡，是不是没有转膜完全呀？谢谢大家，请支招。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-06 21:57:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianhuijuan

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励参与解答 2010-12-07 08:25:15
我们一般用60mA 2 h 不过丽春红染色基本上老不成功，不只是温度低还是其他原因。染色前预热也不行..
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-12-06 23:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianhuijuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by tianhuijuan at 2010-12-06 23:08:21:
我们一般用60mA 2 h 不过丽春红染色基本上老不成功，不只是温度低还是其他原因。染色前预热也不行..

我们的蛋白分子量较小 23KD  70kD常用
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-06 23:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananjizhu

新虫 (初入文坛)
哦 这样呀 你为什么不用250mA转试一下  转一个半小时
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-07 06:51:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
湿转的么？分子量太大了。
赞一下(1人) 回复此楼
52187644
5楼2010-12-07 08:39:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianhuijuan

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-09 08:51:03
引用回帖:
Originally posted by yananjizhu at 2010-12-07 06:51:52:
哦 这样呀 你为什么不用250mA转试一下  转一个半小时

我们实验室一直用60mA 2h (0.8mA /cm 2     1.5h ，膜裁的是6*9，理论算0.8*54=43.2mA   1.5h即可)，按说应该转移完全的，顺便说一下用的半干法转移.你们每次染色都顺利吗？ 多谢
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-12-07 14:44:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananjizhu

新虫 (初入文坛)
恩 按我们的条件 可以转过去 染膜能看见t条带
赞一下 回复此楼
7楼2010-12-07 22:37:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananjizhu

新虫 (初入文坛)
就是湿转
回复此楼
8楼2010-12-07 22:38:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-09 08:51:57
时间太少，湿转300mA起码3个小时，或者一抗不好，其实一抗好才是真的好！
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2010-12-07 22:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangleisdnu

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-09 08:52:15
推荐一个prestain 蛋白marker 可以通过180kD的marker来估计你的蛋白转的效率



[ Last edited by wangleisdnu on 2010-12-8 at 04:39 ]
赞一下(2人) 回复此楼
有勇气去改变你可以改变的,有度量去容忍你不能改变的,有智慧去区分上面的两种情况http://bbs.bioon.net/bbs/?66210
10楼2010-12-08 04:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yananjizhu 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 9/450 2026-08-04 03:56 by kf2781974
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 03:35 by k7OM8YghWbkC
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 03:34 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 03:30 by k7OM8YghWbkC
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 03:27 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 4/200 2026-08-04 03:25 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 12/600 2026-08-04 03:17 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 02:10 by Ocx3OKOzGU4q
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 16/800 2026-08-03 12:23 by fuweiguochen
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 12/600 2026-08-03 08:22 by syl200707
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭