应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关western-blot的一些问题
191/2返回列表12下一页
查看: 2772  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

天山脚下

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关western-blot的一些问题 已有10人参与

分子量大小为21kd的蛋白，用厚度为1.5mm的凝胶。

做SDS-PAGE电泳时的电压也是积层胶70V，分离胶100V么？

用PVDF膜湿转的时候，比较合适的电流和时间是多少？

O(∩_∩)O~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-26 20:30:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xj22667

银虫 (小有名气)
天山脚下(金币+1): 2010-05-26 20:44:22
我们实验室用的是半干转 15V 30min 希望对你有帮助
赞一下 回复此楼
2楼2010-05-26 20:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljsh

铁杆木虫 (著名写手)
天山脚下(金币+1): 2010-05-26 21:51:11
PVDF???,250mA 120min
赞一下 回复此楼
3楼2010-05-26 20:52:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiahaitao1016

金虫 (小有名气)
★
天山脚下(金币+1): 2010-05-26 22:03:26
lstt09nk(金币+1):感谢分享经验~~ 2010-06-23 12:39:13
我做的蛋白是24KD的，用PVDF膜湿转，100V恒压，1h.没问题的！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-05-26 22:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouyinggyf

金虫 (正式写手)
天山脚下(金币+1): 2010-05-26 23:01:19
你的胶有点厚，我用的是0.75mm厚的，湿法转膜100V  1h，你最好查一下，要么增加电压要么转的时间长一些

[ Last edited by zhouyinggyf on 2010-5-30 at 23:14 ]
赞一下 回复此楼
5楼2010-05-26 22:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxi8579

铜虫 (正式写手)
我们实验室的老师说虹吸法更好呢
赞一下 回复此楼
6楼2010-05-26 22:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)
★
天山脚下(金币+1): 2010-05-27 15:15:34
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-23 12:40:12
前几天刚做过western-blot，我的蛋白大小是14kd，我当时用的条件是
PVDF膜湿转,200mA 50min 结果发现marker34kd都全部转过去了，所以你那个21kd的建议用200mA 30min应该没问题的，至于做SDS-PAGE电泳 我用的是积层胶10mA，分离胶20mA,具体时间看你的条带在胶中的位置以便做下步的western-blot。
赞一下(1人) 回复此楼
行到水穷处，坐看云起时！
7楼2010-05-27 09:42:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
天山脚下(金币+1): 2010-05-27 16:21:52
给我金币，我给你说，哈哈哈～
赞一下 回复此楼
8楼2010-05-27 15:39:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
21KD。我转过26的，70分钟，200MA恒流，没有问题的·
赞一下 回复此楼
9楼2010-05-27 16:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mayina

铜虫 (初入文坛)
胶的大小，条带的多少都会影响。可以自己摸索，用考马斯亮蓝染色后再转，可以摸索出最适的条件   
个人认为哈
赞一下 回复此楼
10楼2010-06-23 11:38:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天山脚下 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +7 秋有木北 2026-03-14 7/350 2026-03-15 17:30 by 小物理化学
[基金申请] 国自科面上基金字体 +4 iwuli 2026-03-12 5/250 2026-03-15 17:07 by 风云无泪
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 材料与化工 一志愿山大 321分 求调剂 +7 每天散步 2026-03-09 8/400 2026-03-14 02:18 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 材料调剂，307分 +13 张泳铭1 2026-03-09 17/850 2026-03-13 11:09 by 薛云鹏
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 0857 资源与环境 285分 +6 未名考生 2026-03-09 6/300 2026-03-11 21:08 by 30660438
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +8 mingmingry 2026-03-09 9/450 2026-03-11 10:23 by 沙漠之狐994
[考研] 家人们 调剂不迷路 看这里 +8 likeihood 2026-03-09 13/650 2026-03-10 08:09 by likeihood
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭