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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lazylord

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】请教大分子量蛋白western blot转膜的一些问题

有人做过分子量为140以上蛋白的western blot吗?湿转转膜条件一般是怎么样的?一般有什么优化条件。。。。
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lazylord(金币+1): 2011-03-10 08:38:50
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-12 19:30:39
i have experience in semidry transfer, it takes me 2 hours and 50 mA
never try  ????
2楼2011-03-09 21:58:17
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lazylord

金虫 (小有名气)


请问你多大的分子量啊?
3楼2011-03-10 11:19:32
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60-180kda
4楼2011-03-10 19:50:46
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wudiguigui99

银虫 (小有名气)



lazylord(金币+1): 2011-03-12 15:50:58
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-12 19:30:54
我用的是250mA,大概是1h40min
5楼2011-03-10 20:10:20
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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)



rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-12 19:30:59
lazylord(金币+1): 2011-03-14 16:21:08
湿转  得考虑你用的膜孔径的大小来决定转膜时间:孔径大时间短,孔径小,时间长。     180mA
6楼2011-03-12 19:04:24
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tigertang

木虫 (著名写手)


lazylord(金币+1): 2011-03-14 16:20:47
首选湿转,如果抗体好,应该不难杂。90v/2h 可以了。
如果你的蛋白表达高,140kd, 抗体不错,半干转,也应该没问题!
7楼2011-03-12 21:43:23
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涛声依旧本人

银虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
楼主做得怎么样了啊,我现在也遇到问题了哦,问下如果是192KD的呢?
8楼2011-11-30 19:47:47
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tingtingcome

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
额。。我要做的蛋白是300多。。。
9楼2012-09-13 15:24:27
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醉虾322

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
跑过180的,先用8%的胶跑,电转时200mA,一个半小时。
10楼2015-08-03 15:54:02
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hanbo87234

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我在日本做的是 低温室 20mv  18个小时
11楼2015-08-03 16:20:35
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