24小时热门版块排行榜    

查看: 6829  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

qinchen1018

银虫 (初入文坛)

[求助] Western Blot 目标条带跑不出来,内参条带清晰 已有5人参与

各位朋友帮帮忙吧,我是新手,刚学做 western blot,内参条带到是挺清晰,也基本一致,但是我的目标蛋白一个条带都没有,这是为啥啊
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

内参太强 遮盖信号
建议分开检测
话说我也是这样的情况 好难过
10楼2014-04-24 16:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qinchen1018: 金币+2, 有帮助 2013-10-23 15:30:07
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-10-25 13:20:51
这个说的有些笼统,显影时目标条带什么情况,具体点才好分析。内参能检测到,说明基本步骤还是没问题的。
2楼2013-10-23 15:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花开未央

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qinchen1018: 金币+3 2013-10-23 15:30:21
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-25 13:21:03
那就可能是抗体的问题了,重新优化一下抗体浓度,另外看一下你的目标蛋白是多大的,要是小分子蛋白也许是转过了也不一定的,亦或是大分子的没转印完全,内参很好说明整个操作是没问题了,那只能是从抗体找原因了,祝实验顺利!
希望~~~
3楼2013-10-23 15:26:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinchen1018

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2013-10-23 15:25:24
这个说的有些笼统,显影时目标条带什么情况,具体点才好分析。内参能检测到,说明基本步骤还是没问题的。

上样量40微克,内参是GAPDH,目标蛋白是16.5KD、165KD,300mA湿法转膜1h、2h,一抗1:1000稀释,使用odessey成像系统扫膜的
Western Blot 目标条带跑不出来,内参条带清晰
GAPDH.png

4楼2013-10-23 15:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见