应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot实验交流
141/2返回列表12下一页
查看: 1765  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liushang1990

木虫 (小有名气)

[求助] western blot实验交流

western blot结果，目标条带时有时无，而内参一般都还比较好，转膜Marker也很清晰，不知道如何解释。（一抗过夜；二抗室温一小时；转膜80V，1h；封闭5%牛奶室温1h）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
基督耶稣降世，为要拯救罪人。
1楼 2013-09-13 14:11:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

八头小猪

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-13 22:24:06
楼主信息量太少！目标蛋白多大？你用的什么膜？湿转还是干转？？背景如何？是否有非特异性条带出现？最好把内参和目的的图像一起拿出来看看
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-09-13 14:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushang1990

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangyoujian at 2013-09-14 08:57:25
样品是不是同一个样品？条带没有出现是我们会重洗洗膜后再按孵一抗和二抗

是同一个样品，怎么洗啊？TBST？
赞一下(1人) 回复此楼
基督耶稣降世，为要拯救罪人。
4楼2013-09-14 09:39:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zhangyoujian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品是不是同一个样品？条带没有出现是我们会重洗洗膜后再按孵一抗和二抗
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-14 08:57:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushang1990

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 八头小猪 at 2013-09-13 14:58:44
楼主信息量太少！目标蛋白多大？你用的什么膜？湿转还是干转？？背景如何？是否有非特异性条带出现？最好把内参和目的的图像一起拿出来看看

目标蛋白57kd左右，用PVDF膜，湿转，背景很干净，非特异性很少。
赞一下 回复此楼
基督耶稣降世，为要拯救罪人。
5楼2013-09-14 09:43:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

回头太难

银虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉可能是一抗没有包上。。。
赞一下 回复此楼
6楼2013-09-14 09:51:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

八头小猪

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还是上图吧，不然真没法分析，具体什么蛋白，表达量高低也得清楚
赞一下 回复此楼
7楼2013-09-14 14:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guxinhan123

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是抗体问题，抗体有没有过冻融？拿分装过没有冻融的抗体试下，或者可以加大一抗的浓度试试，内参能出来转膜应该没问题
赞一下 回复此楼
8楼2013-09-14 21:25:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushang1990

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 回头太难 at 2013-09-14 09:51:36
感觉可能是一抗没有包上。。。

但为什么时好时坏
赞一下 回复此楼
基督耶稣降世，为要拯救罪人。
9楼2013-09-15 18:08:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushang1990

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by guxinhan123 at 2013-09-14 21:25:36
应该是抗体问题，抗体有没有过冻融？拿分装过没有冻融的抗体试下，或者可以加大一抗的浓度试试，内参能出来转膜应该没问题

没有冻融过，一抗浓度已经很高了
赞一下 回复此楼
基督耶稣降世，为要拯救罪人。
10楼2013-09-15 18:10:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liushang1990 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 东南大学364求调剂 +4 JasonYuiui 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:36 by Linda Hu
[文学芳草园] 伙伴们，祝我生日快乐吧 +15 myrtle 2026-03-10 24/1200 2026-03-15 21:16 by 苏州_逗号
[基金申请] 面上和青基一样限30页不合理 +5 wowsunflower 2026-03-10 7/350 2026-03-14 17:21 by kingkocxr
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +3 归零lbm 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:20 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 0805，333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 26考研求调剂 +5 丶宏Sir 2026-03-13 5/250 2026-03-13 13:05 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭