24小时热门版块排行榜    

查看: 3037  |  回复: 10

yananjizhu

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】westernblot的背景怎么消除呀 已有8人参与

各位虫友,请教westernblot的背景大家都是怎么消除的,180kD的蛋白转膜时间大家都用多少呀!谢谢

[ Last edited by dhd997 on 2010-11-27 at 08:42 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Wb相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jessica533

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-29 19:18:42
如果背景杂带多,我一般注意调整上样量不要太大, 另外延长封闭时间,用5%的脱脂奶粉封闭效果还是不错的,还有就是1抗后一定好好洗洗才加2抗反应。

我没有转过180kD的目的蛋白,不过在75V1h后,marker中250kD的条带也转的不错
把忧愁微掉,将快乐积起。
2楼2010-11-28 11:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinsongna

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
背景重就多封闭会儿呗,用10%的奶粉37度封闭上4个小时
没转过那么大的蛋白,我15V,20min,100KD的marker就转的挺好的
3楼2010-11-28 12:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananjizhu

新虫 (初入文坛)

谢谢 受教了
4楼2010-11-29 13:49:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)

封闭时间不够吧
倚楼听风雨,淡看江湖路!
5楼2010-11-29 13:53:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananjizhu

新虫 (初入文坛)

楼上的同学一般你封闭多久呀
6楼2010-11-30 20:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
延长封闭时间
减少所加二抗的量
增加二抗温浴后的洗涤时间
封闭液中减少AP,生物素等的残留。
使用高效转移缓冲液,例如上海生工的PW039    10X High molecules western blot transfer buffer

[ Last edited by xhjggl on 2010-12-6 at 09:48 ]
7楼2010-12-05 15:21:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananjizhu

新虫 (初入文坛)

8楼2010-12-06 21:59:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rivers_123

铁虫 (小有名气)

封闭时间不够,牛奶浓度低,或者一抗浓度太大,PBST洗的时间短
9楼2010-12-10 14:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieyaru

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我一般是三条带一起做 相同的时间为啥有的深有的浅啊 ?
10楼2012-05-18 00:28:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yananjizhu 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:50 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 5/250 2026-08-04 04:44 by k7OM8YghWbkC
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 9/450 2026-08-04 03:56 by kf2781974
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 03:35 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 12/600 2026-08-04 03:17 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 16/800 2026-08-03 12:23 by fuweiguochen
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[教师之家] 基础研究怎么拉横向,学校到款任务越来越多,难以完成 拉横向,都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 12/600 2026-08-03 08:22 by syl200707
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[基金申请] 系统今天又提示维护了,估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
请填处理意见