24小时热门版块排行榜

返回列表

lichonglx

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 759.1
帖子: 104
在线: 68.7小时
虫号: 927568

[交流] 【求助/交流】胞内表达的EGFP想做western-blot

如题，想做个western-blot看看到底有没有EGFP表达，有谁做过的传授下具体方法啊，例如破细胞方法、抗体选择之类的都行，以前没做过western-blot问的不清楚还请见谅，大家明白意思就行了，速回，谢谢了

回复此楼

» 猜你喜欢

碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner 已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有135人回复
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂已经有0人回复
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner 已经有0人回复
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗已经有0人回复
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner 已经有0人回复
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松已经有0人回复
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析已经有0人回复
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析已经有0人回复
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

为何细胞测序全是杂峰，求解释已经有4人回复
聚合物链建晶胞时，Amorphous Cell模块没法用，求解释已经有9人回复
DMol3优化晶胞的问题已经有14人回复
上皮细胞凋亡形态已经有7人回复
原核表达 pET32a和pET30a Western blot问题已经有9人回复
【资料】studier的自动诱导系统---原核诱导表达蛋白，无需IPTG 已经有125人回复
弱弱的问一句：原核表达 &Western blot 已经有6人回复
Western blot 检测胱氨酸谷氨酸转运体蛋白表达已经有6人回复
【求助/交流】纯化酶切后的膜蛋白做Western blot没条带，why？已经有9人回复
【求助/交流】求助：Western检测转染质粒在细胞内的表达已经有4人回复
【求助/交流】做western blot时，细胞的要求已经有12人回复
做Western blot时荧光瞬间淬灭是什么原因？已经有6人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2010-12-10 09:44:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yinsongna

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 693.5
帖子: 487
在线: 51.4小时
虫号: 817196

★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-10 14:39:37

照个荧光不就看到EGFP是否表达了吗
用细胞刮刀直接把细胞挂下来，加细胞裂解液（可以买，也可以自己配，分子克隆上都有），加loading buffer 煮蛋白，蛋白电泳，转膜，封闭，加一抗二抗，曝光。。。大概的流程就是这样，你可以看下分子克隆，书上都写的有

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2010-12-10 11:20:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lichonglx

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 759.1
帖子: 104
在线: 68.7小时
虫号: 927568

引用回帖:

Originally posted by yinsongna at 2010-12-10 11:20:48:
照个荧光不就看到EGFP是否表达了吗
用细胞刮刀直接把细胞挂下来，加细胞裂解液（可以买，也可以自己配，分子克隆上都有），加loading buffer 煮蛋白，蛋白电泳，转膜，封闭，加一抗二抗，曝光。。。大概的流程就 ...

我想证明是荧光蛋白在发光，所以要买单抗和二抗，我是想问问有没有对应EGFP的的抗体，还是用GFP的

赞一下

回复此楼

3楼2010-12-10 22:27:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖