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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 弱弱的问一句：原核表达 &Western blot
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lixilei1314

金虫 (小有名气)

[交流] 弱弱的问一句：原核表达 &Western blot

如题，请教一下，原核表达和Western blot的关系和区别，貌似一般这两个是一块要做的。
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1楼 2012-03-24 19:25:24
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回帖置顶 ( 共有1个 )

exon2002

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
lixilei1314(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, Good! 2012-03-25 16:17:21
楼上的各位专家说得都正确。其实两者是不可混为一谈的，原核表达是得到体外表达（非大肠菌而言）重组融合蛋白的一种方式之一（其他还有真菌、昆虫、哺乳动物细胞等真核表达），目的在于对该蛋白的功能做进一步的研究。首当其冲的就是制备抗体（抗血清），有了这个抗血清就可以做该蛋白的Western blot了。WB的意义在于用抗体来测定体内各器官组织中有无该蛋白的存在及其含量的多少。当你的目标蛋白为已知，可以在市场上买到其抗体，可用商用抗体做同样的测定，其中包括检验你得到的原核表达蛋白是否真实。
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6楼2012-03-25 08:07:52
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shaquila

金虫 (正式写手)
★
lixilei1314(金币+1): 谢谢参与
区别很大吧。。。。
原核表达是为了制备抗原或纯化蛋白
wb是为了看蛋白表达差异
lz如果不清楚它们具体原理，建议baidu吧
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2楼2012-03-24 21:13:09
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quiller2000

木虫 (著名写手)
★
lixilei1314(金币+1): 谢谢参与
好像真的很大的差别，即便一起做
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3楼2012-03-24 21:34:51
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bbwalkman

木虫 (小有名气)
★
lixilei1314(金币+1): 谢谢参与
这一个是表达蛋白，一个是检测蛋白的。。。关系就是原核表达检测的时候可能会用到WB。。。
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4楼2012-03-24 22:05:31
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to-be

金虫 (正式写手)
★
lixilei1314(金币+1): 谢谢参与
原核表达是将目标蛋白在大肠杆菌中表达出来，后期用于纯化或者其他目的。
Weston是一种检测手段，检测目标蛋白在不在你的样品中，或者验证 是不是你的目标蛋白。
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5楼2012-03-24 22:58:02
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lixilei1314

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by exon2002 at 2012-03-25 08:07:52:
楼上的各位专家说得都正确。其实两者是不可混为一谈的，原核表达是得到体外表达（非大肠菌而言）重组融合蛋白的一种方式之一（其他还有真菌、昆虫、哺乳动物细胞等真核表达），目的在于对该蛋白的功能做进一步的研 ...

呵呵，醍醐灌顶啊。非常感谢，看过后就明白了。
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7楼2012-03-25 12:59:34
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