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scauchjy金虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】帮忙分析下western结果 已有3人参与
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| 各位战友，我做的是香蕉果实一个转录因子的western，大小26 kDa左右，上样30 ug，我们做过考染，条带比较清晰，抗体是委托公司通过原核表达，蛋白纯化和兔血清纯化得来的，二抗是promega的羊抗兔带AP标记。我们的转膜条件是100 毫安转6 h，封闭液是3%BSA+TBST，4度封闭过夜，一抗浓度1：2000，反应3 h，二抗使用浓度1：5000，反应1 h。NBT和BCIP显色。我这个图片显色时间较长。得到的结果是条带多，目的条带为图片箭头所示。请大家帮忙分析下是啥原因，是不是封闭不好还是一抗使用浓度高了？多谢了！ |
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