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lichonglx

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】胞内表达的EGFP想做western-blot

如题,想做个western-blot看看到底有没有EGFP表达,有谁做过的传授下具体方法啊,例如破细胞方法、抗体选择之类的都行,以前没做过western-blot问的不清楚还请见谅,大家明白意思就行了,速回,谢谢了
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yinsongna

金虫 (正式写手)



dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-10 14:39:37
照个荧光不就看到EGFP是否表达了吗
用细胞刮刀直接把细胞挂下来,加细胞裂解液(可以买,也可以自己配,分子克隆上都有),加loading buffer 煮蛋白,蛋白电泳,转膜,封闭,加一抗二抗,曝光。。。大概的流程就是这样,你可以看下分子克隆,书上都写的有
2楼2010-12-10 11:20:48
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