应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western blot 转膜后只看到marker条带，看不到样本，是怎么回事？
51/1返回列表
查看: 4201  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhuzhuba1

银虫 (初入文坛)

[求助] western blot 转膜后只看到marker条带，看不到样本，是怎么回事？

电泳在浓缩胶用80v跑了40分钟，蓝色的线到浓缩胶和分离胶交界处时转成120v，再跑1小时，蓝线到分离胶底部时结束。转膜用的是pvdf膜，用甲醇浸泡5秒，后放在转膜缓冲液中，转膜顺序正确，挤出气泡，转膜2个小时后，能看到marker条带清晰在膜上，但就是看不到蛋白，不知什么原因
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-21 10:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytxy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-07-21 15:56:22
zhuzhuba1: 金币+1, ★有帮助 2012-07-23 14:55:53
marker 是预染的，有颜色的，当然能看见了。蛋白要最后通过发光物才能间接指示。你也可以把膜或胶用丽春红或考马斯亮蓝染一下，可以看出蛋白条带。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-07-21 12:32:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuzhuba1

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ytxy at 2012-07-21 12:32:39
marker 是预染的，有颜色的，当然能看见了。蛋白要最后通过发光物才能间接指示。你也可以把膜或胶用丽春红或考马斯亮蓝染一下，可以看出蛋白条带。

我用丽春红染了，还是看不到，会不会是电泳时间太久了
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-22 09:10:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

废哥117

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhuzhuba1: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-23 14:56:08
甲醇一般激活30秒到一分钟，激活不充分的话，可能会转不上去，还有你的转膜条件是什么？是恒压还是恒流？
再一个就是你的上样量多少？蛋白浓度高或者低？丽春红的敏感度并不是很好，你可以在里面多染一会，或者你的丽春红已经失效
赞一下(1人) 回复此楼
不断提高自己
4楼2012-07-22 11:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ankang0910

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先膜上有marker就说明转膜没有问题，2楼正解，marker 是预染的肯定能看见喽，关键是你染色的一步，现在常用化学发光，其他的没有接触过。
赞一下(1人) 回复此楼
实验顺利！！
5楼2012-07-23 14:12:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhuzhuba1 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:46 by k7OM8YghWbkC
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:37 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 13/650 2026-08-04 07:30 by k7OM8YghWbkC
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 8/400 2026-08-04 06:15 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 06:07 by k7OM8YghWbkC
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 4/200 2026-08-04 04:54 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 9/450 2026-08-04 03:56 by kf2781974
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 16/800 2026-08-03 12:23 by fuweiguochen
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭