| 查看: 3227 | 回复: 3 | ||
zehego木虫 (小有名气)
|
[求助]
请问用Western做co-ip，内参要如何设置，内参是必须的吗？
|
| rt 咨询过好像做western的内参是必须的，那么做co-ip是不是也一样需要内参呢？ 现在在一个新实验室，在做的一个co-ip实验好像没有设置内参，所以想来咨询一下 谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有112人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求做Co-IP好用的myc 或GFP抗体，或者偶联的beads
已经有4人回复
- western 内参beta-actin条带跑不出来
已经有17人回复
- WB条带总是不太整齐
已经有6人回复
- 使用293T细胞做western blot，一般使用什么做内参？actin,还是？
已经有4人回复
- 【求助/交流】做实时定量PCR需要校正内参吗？
已经有9人回复
- 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
已经有19人回复
zehego2楼2013-08-13 06:05:04
zehego
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1541.5
- 散金: 14
- 红花: 1
- 帖子: 241
- 在线: 69.4小时
- 虫号: 999901
- 注册: 2010-04-18
- 专业: 蛋白质组学
3楼2013-08-13 21:28:53
|
CO-IP用于检测细胞内的两个蛋白的相互作用，（就是A 和 B 有没有 interaction） 大概思路就是：提取细胞蛋白质，用A的抗体结合A，然后用beads沉降A，洗沉降物，然后用沉降物做western blot检测 B。 结果： 如果A 和B相互作用，就是一个complex，沉降A时，B也会被沉降下来，western blot就能测到；如果A和B没有相互作用，沉降A时，B不被沉降，沉降物的western blot中没有B的条带。 需要的参考量有：input（开始的细胞蛋白质提取，检测A,B 保证俩个蛋白质均正常表达）， 上清液 (随便取得名字，针对的是沉降物而言的，沉降后分的两相，一个沉降物，一个就是它了，如果可以，把这个也点在你的western blot 中，这个一般文章里不需要，但是如果实验需要赶紧时，这个很有帮助）。 |
4楼2013-08-14 04:31:38
