| 查看: 6643 | 回复: 6 | ||
乖乖宝贝金虫 (小有名气)
|
[求助]
WB条带总是不太整齐
|
最近做WB，不管是内参还是目的条带，总是几条出现波浪或者是毛边现象。想求助遇到类似情况的同学，都是怎么解决的！谢谢啦……附图 KZ7GS472RH@2]Z$Q7C6E%XC.jpg  LR}RFV1VDP{S`{B9PKD]J@H.jpg  U46N4BO7U$Y5$({FPWGN`NL.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
申博发邮件
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- WB结果分析时，为什么背景灰度值要比目的条带高呢？
已经有9人回复
- 请问WB的数据在论文中应该怎样给出才算标准？
已经有21人回复
- 最近做WB实验，膜总是很花
已经有13人回复
- WB定量的参照问题
已经有9人回复
- WB上样时样品往上漂溢出孔外，电泳后考马斯亮蓝染色条带特别浅几乎看不到。
已经有4人回复
- co-IP 条带问题
已经有10人回复
- WB条带全出来了· ----各种条带··求分析
已经有12人回复
- WB显影结果分子量漂移
已经有16人回复
- WB显影结果分析
已经有14人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- wb，条带异常，拖尾，弥散。
已经有8人回复
- WB实验，胶片问题
已经有10人回复
- 做WB实验，关于抗体的选择？
已经有5人回复
- WB检测磷酸化蛋白
已经有41人回复
- WB 有内参 么有目得。why ?
已经有4人回复
- WB定量问题
已经有13人回复
- WB显影用手动曝光，加入ECL底物，为什么在吸走底物后，就没有亮光了？
已经有4人回复
- WB结果不理想，呼唤帮助
已经有20人回复
- 求助 原核表达WB 多条带
已经有11人回复
- 【求助/交流】立春红 WB 染色
已经有11人回复
- 【求助/交流】TBST配方会影响WB结果吗
已经有4人回复
- 【求助/交流】WB老做不出来
已经有6人回复
- 【求助/交流】纯化酶切后的膜蛋白做Western blot没条带，why？
已经有9人回复
- 【求助/交流】小鼠单抗做WB的问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】WB电泳条带窄 但颜色深
已经有5人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 4
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-03-24 01:15:58
wizardfan
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 18
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 1.818
- 金币: 24648.2
- 散金: 197
- 红花: 48
- 沙发: 2
- 帖子: 2254
- 在线: 400.7小时
- 虫号: 1879241
- 注册: 2012-07-05
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
3楼2013-03-24 09:43:52
myprayer
专家顾问 (著名写手)
- BioEPI: 4
- 应助: 81 (初中生)
- 贵宾: 2.822
- 金币: 32409.7
- 散金: 1696
- 红花: 160
- 沙发: 3
- 帖子: 2275
- 在线: 822.5小时
- 虫号: 1759711
- 注册: 2012-04-16
- 专业: 生物力学与生物流变学
- 管辖: 生物医药区
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
乖乖宝贝: 金币+5, ★有帮助, 谢谢你的答复，忽然间觉得pH真的好重要！我每次跑胶都有那么些条带不好看。 2013-03-24 13:20:22
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-03-25 08:49:29
感谢参与，应助指数 +1
乖乖宝贝: 金币+5, ★有帮助, 谢谢你的答复，忽然间觉得pH真的好重要！我每次跑胶都有那么些条带不好看。 2013-03-24 13:20:22
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-03-25 08:49:29
|
出来胶带说明其他的都没有问题，marker也是正常的。可以从以下几个途径改变 一 ：试着看下当时配置浓缩胶和分离胶的参数比例，是不是和你要测的蛋白质样品的分子量大小合适，这个可以参考相关文献或者有蛋白质样品对照库里面有配置浓度的指导。 二：就是胶带里位置梯度的PH浓度是否合理，分离胶的浓度一般情况下比较低，所以合适的PH也是做出perfect胶的利器。 三：就是所选用的染料或自发荧光的问题，选择性的使用考马斯亮蓝R-250通常，银盐染料，violet17或者溴化乙锭等染色，这个你可以看一下之前的实验是怎么进行的。 四：可能是你的胶带分离后暗室X放射自显的时候没有曝光好。 五：当时梳子的之后注射混进去微小的气泡，导致胶带不均匀。 最差的就是和之前有人提供的一样，一些试剂可能是假冒伪劣产品，也不排除这种情况。 期待小虫子能跑出完美漂亮的条带，再发个美美的paper。 |
4楼2013-03-24 12:20:55
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 4
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
5楼2013-03-24 14:28:00
6楼2013-03-24 23:09:18
7楼2013-03-25 14:01:27
