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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB上样时样品往上漂溢出孔外，电泳后考马斯亮蓝染色条带特别浅几乎看不到。
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molier115

新虫 (初入文坛)

[求助] WB上样时样品往上漂溢出孔外，电泳后考马斯亮蓝染色条带特别浅几乎看不到。

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     WB上样时样品往上漂溢出孔外，电泳后考马斯亮蓝染色条带特别浅几乎看不到。开始怀疑是自己配制的上样缓冲液有问题，但我换用普利莱公司的上样缓冲液照样会往外漂，电泳后条带不仔细看就看不到，难道是蛋白样品的浓度太低了？我的是脂肪细胞中的蛋白，浓度是1.19ug/ul，上样8ug，有哪位高手指点一下啊，我被这问题困扰了好久了，头疼死了。
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1楼 2012-09-21 09:24:36
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ljlbk

木虫 (正式写手)
楼主金币少，帮楼主增加悬赏金5个，应助成功，和楼主的一起送出。
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判断正确接受新知处世明快汲取经验善用知识
2楼2012-09-23 09:49:29
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molier115

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ljlbk at 2012-09-23 09:49:29
楼主金币少，帮楼主增加悬赏金5个，应助成功，和楼主的一起送出。

谢谢了，怎么没有人答复呢，难道都没遇到过？
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3楼2012-09-26 17:26:24
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

不知道你的样品为什么会漂，从来没遇到过。至于为什么考染很浅，是因为上样量偏小，如果不是纯化过的蛋白，小胶上30ug，大胶50ug。
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4楼2012-09-27 08:01:37
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ciciloveneo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得是配蛋白样品的SDS里甘油不够，所以上样的时候样品不能沉降到孔里吧~
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5楼2012-09-28 16:20:56
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