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molier115

新虫 (初入文坛)

[求助] WB上样时样品往上漂溢出孔外,电泳后考马斯亮蓝染色条带特别浅几乎看不到。

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     WB上样时样品往上漂溢出孔外,电泳后考马斯亮蓝染色条带特别浅几乎看不到。开始怀疑是自己配制的上样缓冲液有问题,但我换用普利莱公司的上样缓冲液照样会往外漂,电泳后条带不仔细看就看不到,难道是蛋白样品的浓度太低了?我的是脂肪细胞中的蛋白,浓度是1.19ug/ul,上样8ug,有哪位高手指点一下啊,我被这问题困扰了好久了,头疼死了。
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ljlbk

木虫 (正式写手)

楼主金币少,帮楼主增加悬赏金5个,应助成功,和楼主的一起送出。
判断正确接受新知处世明快汲取经验善用知识
2楼2012-09-23 09:49:29
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molier115

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ljlbk at 2012-09-23 09:49:29
楼主金币少,帮楼主增加悬赏金5个,应助成功,和楼主的一起送出。

谢谢了,怎么没有人答复呢,难道都没遇到过?
3楼2012-09-26 17:26:24
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

不知道你的样品为什么会漂,从来没遇到过。至于为什么考染很浅,是因为上样量偏小,如果不是纯化过的蛋白,小胶上30ug,大胶50ug。
4楼2012-09-27 08:01:37
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ciciloveneo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得是配蛋白样品的SDS里甘油不够,所以上样的时候样品不能沉降到孔里吧~
5楼2012-09-28 16:20:56
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