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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做WB实验，关于抗体的选择？
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晴天1882

木虫 (正式写手)

[求助] 做WB实验，关于抗体的选择？

我做的蛋白前体分子量是120KDa，成熟分子量为160KDa，但做WB实验选择抗体有要求吗？文献中报道也没详细说，有的图片是做120KDa的有的是做160KDa，就是想知道用一种抗体能行还是针对不同的分子量选用不同的抗体，哪位知道的同学麻烦讲解下啊！谢谢了啊！
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人有绝交，才有至交！
1楼 2011-08-26 11:33:36
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good 2011-08-26 17:48:52
晴天1882(金币+5): 谢谢了啊！ 2011-08-26 18:36:01
西瓜(金币+3, MolEPI+1): 正解啊~补上EPI！ 2011-08-28 16:59:47
这个要看你选择的抗体识别的特异片段了，如果你选的抗体的识别片段在前体蛋白和靶蛋白上都具备的话就应该可以显示出两条带，因此你也可以选择只识别前体蛋白或靶蛋白的抗体，具体的就要看你的实验目的了，如果你想说明靶蛋白量多了可以选择抗靶蛋白的抗体，同时最好也做一下两种都识别的抗体
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2楼2011-08-26 12:55:08
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晴天1882

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by elvias at 2011-08-26 12:55:08:
这个要看你选择的抗体识别的特异片段了，如果你选的抗体的识别片段在前体蛋白和靶蛋白上都具备的话就应该可以显示出两条带，因此你也可以选择只识别前体蛋白或靶蛋白的抗体，具体的就要看你的实验目的了，如果你想 ...

谢谢了！也就是说还是有两种不同抗体的可供选择的，但我也不知道到底是要哪个部分，反正有条带就行了，前体蛋白不是会经过一系列的过程最后变成成熟的蛋白吗？怎么还是会有前体蛋白的存在？
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人有绝交，才有至交！
3楼2011-08-26 13:25:21
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 热心哦 2011-08-26 17:49:05
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晴天1882 at 2011-08-26 13:25:21:
谢谢了！也就是说还是有两种不同抗体的可供选择的，但我也不知道到底是要哪个部分，反正有条带就行了，前体蛋白不是会经过一系列的过程最后变成成熟的蛋白吗？怎么还是会有前体蛋白的存在？

要看你是什么前体蛋白了，有的前体蛋白只有在强烈的信号作用下才完全成熟
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4楼2011-08-26 13:43:09
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晴天1882

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by elvias at 2011-08-26 13:43:09:
要看你是什么前体蛋白了，有的前体蛋白只有在强烈的信号作用下才完全成熟

我要做的是低密度脂蛋白（LDLR），那也就是说细胞或是动物组织里可能同时存在前体蛋白和靶蛋白？
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人有绝交，才有至交！
5楼2011-08-26 14:22:29
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zhwlsy

金虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-28 07:52:18
前体蛋白是应该被加工成 成熟蛋白了，但是，细胞的某一时间点中细胞内是两种形式的蛋白同时存在的，因为细胞在不断合成蛋白呀！
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神秘的分子生物学
6楼2011-08-27 23:31:57
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