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乖乖宝贝金虫 (小有名气)
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[求助]
WB条带总是不太整齐
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最近做WB，不管是内参还是目的条带，总是几条出现波浪或者是毛边现象。想求助遇到类似情况的同学，都是怎么解决的！谢谢啦……附图 KZ7GS472RH@2]Z$Q7C6E%XC.jpg  LR}RFV1VDP{S`{B9PKD]J@H.jpg  U46N4BO7U$Y5$({FPWGN`NL.jpg |
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myprayer
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
乖乖宝贝: 金币+5, ★有帮助, 谢谢你的答复，忽然间觉得pH真的好重要！我每次跑胶都有那么些条带不好看。 2013-03-24 13:20:22
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-03-25 08:49:29
感谢参与，应助指数 +1
乖乖宝贝: 金币+5, ★有帮助, 谢谢你的答复，忽然间觉得pH真的好重要！我每次跑胶都有那么些条带不好看。 2013-03-24 13:20:22
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-03-25 08:49:29
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出来胶带说明其他的都没有问题，marker也是正常的。可以从以下几个途径改变 一 ：试着看下当时配置浓缩胶和分离胶的参数比例，是不是和你要测的蛋白质样品的分子量大小合适，这个可以参考相关文献或者有蛋白质样品对照库里面有配置浓度的指导。 二：就是胶带里位置梯度的PH浓度是否合理，分离胶的浓度一般情况下比较低，所以合适的PH也是做出perfect胶的利器。 三：就是所选用的染料或自发荧光的问题，选择性的使用考马斯亮蓝R-250通常，银盐染料，violet17或者溴化乙锭等染色，这个你可以看一下之前的实验是怎么进行的。 四：可能是你的胶带分离后暗室X放射自显的时候没有曝光好。 五：当时梳子的之后注射混进去微小的气泡，导致胶带不均匀。 最差的就是和之前有人提供的一样，一些试剂可能是假冒伪劣产品，也不排除这种情况。 期待小虫子能跑出完美漂亮的条带，再发个美美的paper。 |
4楼2013-03-24 12:20:55
cicelyzh
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