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乖乖宝贝

金虫 (小有名气)

[求助] WB条带总是不太整齐

最近做WB,不管是内参还是目的条带,总是几条出现波浪或者是毛边现象。想求助遇到类似情况的同学,都是怎么解决的!谢谢啦……附图

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尽自己最大的努力,优秀毕业!
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
乖乖宝贝: 金币+3, 最近因为胶,出现了好多奇奇怪怪的现象。 2013-03-24 13:21:46
可能是胶凝得不是很均一。
2楼2013-03-24 01:15:58
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
乖乖宝贝: 金币+3 2013-03-24 13:22:13
胶的问题,其他因素不太可能产生类似的效果
3楼2013-03-24 09:43:52
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myprayer

专家顾问 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
乖乖宝贝: 金币+5, 有帮助, 谢谢你的答复,忽然间觉得pH真的好重要!我每次跑胶都有那么些条带不好看。 2013-03-24 13:20:22
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-03-25 08:49:29
出来胶带说明其他的都没有问题,marker也是正常的。可以从以下几个途径改变
一 :试着看下当时配置浓缩胶和分离胶的参数比例,是不是和你要测的蛋白质样品的分子量大小合适,这个可以参考相关文献或者有蛋白质样品对照库里面有配置浓度的指导。
二:就是胶带里位置梯度的PH浓度是否合理,分离胶的浓度一般情况下比较低,所以合适的PH也是做出perfect胶的利器。
三:就是所选用的染料或自发荧光的问题,选择性的使用考马斯亮蓝R-250通常,银盐染料,violet17或者溴化乙锭等染色,这个你可以看一下之前的实验是怎么进行的。
四:可能是你的胶带分离后暗室X放射自显的时候没有曝光好。
五:当时梳子的之后注射混进去微小的气泡,导致胶带不均匀。
最差的就是和之前有人提供的一样,一些试剂可能是假冒伪劣产品,也不排除这种情况。
期待小虫子能跑出完美漂亮的条带,再发个美美的paper。
4楼2013-03-24 12:20:55
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-24 01:15:58
可能是胶凝得不是很均一。

胶是否凝得很慢或者很快?凝胶的速度会影响胶的质量。
5楼2013-03-24 14:28:00
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匿名

用户注销 (小有名气)

★ ★
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wizardfan: 金币+2, 鼓励老新虫发帖交流,以后常来 2013-03-25 08:49:11
本帖仅楼主可见
6楼2013-03-24 23:09:18
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taomm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 鼓励老新虫发帖交流,以后常来 2013-03-26 06:44:20
乖乖宝贝: 金币+3, 有帮助 2013-03-26 12:59:25
凝胶不均一,或者是电泳时候电场不均一。看看两条电极线上有无气泡,电泳过程中有无漏液导致不通电等~
7楼2013-03-25 14:01:27
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