24小时热门版块排行榜    

查看: 1459  |  回复: 4

lixuem2012

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 显色6组里边只有一组有条带,急,求助!谢谢!

做蛋白免疫印迹,一共6组,除样品外,其他操作完全一致,为什么每次显色只有一组能显出,并且很亮;其他却没有,显不出来。怀疑过蛋白降解,电泳后考染,结果显示各组条带分部一致,说明并没有降解。实在搞不清楚原因,请各位高手指点。比较着急,又懂的请告知一下,我应该怎么做呢?或者怎么来继续验证??谢谢!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixuem2012

新虫 (初入文坛)

补充:做的内参β-actin,反反复复做过好多次了,最多时候显示出3组有条带。后来重新变性的样品,现在只有一组能显出来。步骤什么应该不是问题,同学做其他样品的,同样条件可以做出来。我这个的问题不是做不出来,而是6组只有1组能显出,那其他的到底怎么回事呢????纠结的实验……
2楼2012-08-27 10:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CellZe

金虫 (小有名气)

是不是一抗的问题?
一抗失效或者是浓度过低什么的
天道酬勤
3楼2012-08-30 09:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thaibin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lixuem2012: 金币+5, 有帮助 2012-09-03 20:31:53
actin应该很好出啊。  
1. 转膜后厉春红染膜看一下,转膜有没有问题
2.杂抗体 洗膜等过程, 膜是分开做的 还是叠在一起了?
3.ECL是否作用均匀
4.延长曝光时间 是否有条带
Dreamit!Beit!
4楼2012-08-30 10:25:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixuem2012

新虫 (初入文坛)

换了种抗体,做是做出来了,只是有的组条带很浅。二抗再次孵育后,背景一片黑,看来不能重复做,这几天忙别的就给搁置了。依旧没搞清楚,这个抗体别人用着很好,没啥问题,我的样品却不行……后边再做做看吧,谢谢各位O(∩_∩)O~
5楼2012-09-03 20:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lixuem2012 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 312求调剂 +3 陌宸希 2026-03-16 4/200 2026-03-16 15:06 by peike
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 求调剂,一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 抓着星星的女孩 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:47 by userper
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子!
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
信息提示
请填处理意见