应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】western blot
101/1返回列表
查看: 1654  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wdongdong

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】western blot 已有9人参与

本人最近在做western blot，2抗孵育并洗涤后，加入了ECL HRP底物后，能立刻看到目的条带，但压片后始终看不到目的带，胶片上什么都没有，整个压片系统是没有问题的，我不知道出了什么问题？
   用的碧云天的HIS抗体，条带大小也差不多，怎么在胶片上没任何信号了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-06-30 19:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-01 08:36:54
不知道你做了其他对比试验么？比方说其他同学是否也出现这样的问题呢？
另外你的显色液是否放置时间太长，保存是否合适导致了荧光时间变短，所以压片的时候信号不强了？
赞一下(2人) 回复此楼
52187644
2楼2010-06-30 22:39:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-01 08:36:46
你先把你的胶片拿出来见光死，然后显影定影看看有没有先~~确保试剂没有变质
我就遇到过一次试剂变质而做不出来
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-06-30 23:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意楼上的说法，有时候就是显影剂不好用
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-07-01 08:53:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsxnd

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-30 23:13:52:
你先把你的胶片拿出来见光死，然后显影定影看看有没有先~~确保试剂没有变质
我就遇到过一次试剂变质而做不出来

正解
回复此楼
5楼2010-07-01 09:29:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiahaitao1016

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-01 10:48:45
1. 可能是显影液有问题，或者显影液显影效果不好了，适当延长显影时间。
2. 荧光淬灭太快，在你压胶片前就已经淬灭了，所以胶片感光不到。压片动作迅速一点。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-07-01 10:45:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx314

金虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你把二抗稀释1：8000试试，我遇到过，二抗太浓了。很快消耗了ECL
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-07-29 15:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seahow

木虫 (著名写手)
一定是 显影液的问题，错了包换；
赞一下 回复此楼
8楼2010-07-29 15:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玛格丽特的

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
肯定是显影液定影液的问题，有时候放个两三周就坏了
赞一下 回复此楼
9楼2018-05-25 11:04:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wspvi

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
二抗稀释试试，二抗太高，很快消耗了ECL
赞一下 回复此楼
10楼2018-05-25 11:08:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wdongdong 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭