24小时热门版块排行榜    

查看: 1458  |  回复: 4

lixuem2012

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 显色6组里边只有一组有条带,急,求助!谢谢!

做蛋白免疫印迹,一共6组,除样品外,其他操作完全一致,为什么每次显色只有一组能显出,并且很亮;其他却没有,显不出来。怀疑过蛋白降解,电泳后考染,结果显示各组条带分部一致,说明并没有降解。实在搞不清楚原因,请各位高手指点。比较着急,又懂的请告知一下,我应该怎么做呢?或者怎么来继续验证??谢谢!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixuem2012

新虫 (初入文坛)

补充:做的内参β-actin,反反复复做过好多次了,最多时候显示出3组有条带。后来重新变性的样品,现在只有一组能显出来。步骤什么应该不是问题,同学做其他样品的,同样条件可以做出来。我这个的问题不是做不出来,而是6组只有1组能显出,那其他的到底怎么回事呢????纠结的实验……
2楼2012-08-27 10:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CellZe

金虫 (小有名气)

是不是一抗的问题?
一抗失效或者是浓度过低什么的
天道酬勤
3楼2012-08-30 09:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thaibin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lixuem2012: 金币+5, 有帮助 2012-09-03 20:31:53
actin应该很好出啊。  
1. 转膜后厉春红染膜看一下,转膜有没有问题
2.杂抗体 洗膜等过程, 膜是分开做的 还是叠在一起了?
3.ECL是否作用均匀
4.延长曝光时间 是否有条带
Dreamit!Beit!
4楼2012-08-30 10:25:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixuem2012

新虫 (初入文坛)

换了种抗体,做是做出来了,只是有的组条带很浅。二抗再次孵育后,背景一片黑,看来不能重复做,这几天忙别的就给搁置了。依旧没搞清楚,这个抗体别人用着很好,没啥问题,我的样品却不行……后边再做做看吧,谢谢各位O(∩_∩)O~
5楼2012-09-03 20:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lixuem2012 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +15 不知道叫什么! 2026-03-15 17/850 2026-03-17 10:13 by Sammy2
[考研] 271求调剂 +11 生如夏花… 2026-03-11 13/650 2026-03-17 09:02 by 雾散后相遇lc
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 4/200 2026-03-16 23:52 by zbzihdhd
[考研] 材料专硕326求调剂 +5 墨煜姒莘 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:30 by 木瓜膏
[文学芳草园] 伙伴们,祝我生日快乐吧 +17 myrtle 2026-03-10 26/1300 2026-03-16 18:32 by 青橙Ln
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[硕博家园] 深圳大学硕士招生(2026秋,传感器方向,仅录取第一志愿) +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见