24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1034  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

doubleping

新虫 (小有名气)

[求助] V3区pcr出现非特异性条带怎么办?

我用16S的pcr产物扩增V3区,目的片段在250bp左右,但是我扩增出来出现了四条很淡的非特异性条带,大小在1400-300bp之间,不明白这是为什么?给位大神给点意见吧!!!!
我使用体系是2*taq mastermix 15ul,引物 10um/ml  各1ul,模版1ul,ddH2O 12ul,总共30ul,程序是touchdownPCR程序,枪头和水、离心管都是高温灭菌过的,不过没有在超净台和冰上操作。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 久久季雨 at 2013-07-21 11:58:58
能不能把图弄上来!也不一定是非特异性条带~

我的图是tif格式的,一直上传不了,请指点
5楼2013-07-21 16:45:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-21 12:39:52
延伸时间和退火温度是多少?
试试减少一些引物和模版的量
2楼2013-07-21 11:48:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

久久季雨

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能不能把图弄上来!也不一定是非特异性条带~
我就是我!带不了假面具
3楼2013-07-21 11:58:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wubingqi at 2013-07-21 11:48:53
延伸时间和退火温度是多少?
试试减少一些引物和模版的量

我用的是touchdownPCR程序,65-55摄氏度,一分钟
4楼2013-07-21 12:00:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +12 MAX怅惘 2026-04-09 13/650 2026-04-09 23:32 by cls512
[考研] 305求调剂 +4 77Qi 2026-04-07 4/200 2026-04-09 17:27 by wp06
[考研] 调剂 +12 JLLLLLLLLLL 2026-04-03 12/600 2026-04-09 16:14 by angeltong
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
[考研] 388求调剂 +6 四川王涛 2026-04-07 8/400 2026-04-08 00:17 by JourneyLucky
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
[考研] 0854电子信息319求调剂(接受跨专业调剂) +5 星星不眨眼喽 2026-04-05 6/300 2026-04-07 22:16 by hemengdong
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +7 晚风不晚 2026-04-04 7/350 2026-04-06 14:06 by houyaoxu
[考研] 化学357分,考研调剂 +11 .Starry. 2026-04-04 12/600 2026-04-06 06:28 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:23 by hemengdong
[考研] 377求调剂 +6 by.ovo 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:18 by dongzh2009
[考研] 调剂 +3 李广火 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:57 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +13 一样YWY 2026-04-03 14/700 2026-04-05 18:20 by 蓝云思雨
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 材料化工306分找合适调剂 +14 沧海轻舟e 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:53 by 朱云虎202
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
信息提示
请填处理意见