应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR非特异性条带
161/2返回列表12下一页
查看: 1692  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hsingyu

木虫 (正式写手)

[求助] PCR非特异性条带

RT-PCR之后凝胶电泳图上好多非特异性条带，问题是我用的同一批样品同样的条件去P的为什么有的就特异性非常好，有的却很差？引物有问题？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
做最好的自己~
1楼 2012-07-27 09:18:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有3个 )

thunder00

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
hsingyu: 回帖置顶 2012-07-27 18:10:31
你的退火温度不够，建议优化PCR条件
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-27 11:23:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyanxiabd

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 回帖置顶 2012-09-02 17:12:54
你换一对引物，看是否还出现同样的结果！体系、退火温度、引物不一样，扩展的结果就会不同
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-27 13:07:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
hsingyu: 回帖置顶 2012-07-28 10:17:47
引物不同就不好比较了。如果只是过程中杂带较大，可以提高退火温度、降低循环次数试试。此外，减少退火时间有时也可以考虑。
赞一下 回复此楼
8楼2012-07-28 09:06:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用的引物是相同的吗？个人觉得应该是引物的问题
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-27 10:37:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsingyu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-07-27 10:37:45
你用的引物是相同的吗？个人觉得应该是引物的问题

同样的cDNA，不同的引物
赞一下 回复此楼
做最好的自己~
3楼2012-07-27 10:50:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不同引物，特异性结合不同，建议进行温度梯度PCR
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-27 11:55:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0008meng

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是引物发生二聚化
赞一下 回复此楼
7楼2012-07-27 13:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsingyu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by joan198108 at 2012-07-28 09:06:19
引物不同就不好比较了。如果只是过程中杂带较大，可以提高退火温度、降低循环次数试试。此外，减少退火时间有时也可以考虑。

我已经比上一次PCR用的退火温度提高了几度还是没办法消除非特异性条带，减少退火时间有用吗？我退火设的是20s
赞一下 回复此楼
做最好的自己~
9楼2012-07-28 10:20:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 同意 2012-09-02 17:13:12
引物二聚体很少有没有的，所以有二聚体也没关系，只要有目的条带就可以，至于非特异性条带，说明退火温度不是最适合的！
赞一下 回复此楼
坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
10楼2012-07-28 11:37:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hsingyu 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 287求调剂 +7 晨昏线与星海 2026-03-19 8/400 2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +5 tcxiaoxx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:35 by laoshidan
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +11 墨墨漠 2026-03-18 12/600 2026-03-20 19:43 by 丁丁*
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 3/150 2026-03-20 11:58 by 呱呱呱呱叫
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +10 秋有木北 2026-03-14 10/500 2026-03-19 05:52 by anny19840123
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +5 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 6/300 2026-03-18 17:53 by 无际的草原
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭！ 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭