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lhm_hnyj

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[交流] 【求助/交流】测序问题：PCR产物未纯化测序会怎样？已有7人参与

之前送了一些PCR未纯化产物去公司测序，不知道是不是忘了标明，在收费单上显示是纯化产物测序，看了下大部分图谱都很正常，不知道是公司弄错了，还是确实影响不大。少数有不大严重套峰的情况如下图，基本也能判读，弄不清是产物条带不单一还是未纯化引起的，麻烦大家帮看看。

[ Last edited by lhm_hnyj on 2010-12-20 at 11:59 ]

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1楼 2010-12-20 11:52:07

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guoxingjun2008

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-20 15:40:57

引用回帖:

Originally posted by lhm_hnyj at 2010-12-20 11:52:07:
之前送了一些PCR未纯化产物去公司测序，不知道是不是忘了标明，在收费单上显示是纯化产物测序，看了下大部分图谱都很正常，不知道是公司弄错了，还是确实影响不大。少数有不大严重套峰的情况如下图，基本也能判读 ...

其实对于一般克隆来说，PCR产物测序是可以的，然后看看同源性。但是如果对测序结果很严格，比如做点突变，那就需要用高保真Taq酶扩增，然后连T载体后测序，这样测得结果比单纯PCR产物要准确很多！

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2楼2010-12-20 11:55:06

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lhm_hnyj

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引用回帖:

Originally posted by guoxingjun2008 at 2010-12-20 11:55:06:

其实对于一般克隆来说，PCR产物测序是可以的，然后看看同源性。但是如果对测序结果很严格，比如做点突变，那就需要用高保真Taq酶扩增，然后连T载体后测序，这样测得结果比单纯PCR产物要准确很多！

哦，您的意思我明白了。这里我是不大清楚PCR产物未经过纯化直接测序会有什么后果，峰图上有什么表现？