| 查看: 1580 | 回复: 4 | ||
[求助]
PCR扩增去除终止密码子
|
| 最近要构建一个重组质粒，在原有的重组质粒目的基因的C末端上面加上一段基因，所以首先要去除原来目的基因的终止子TAG，设计引物后直接拿重组质粒作为模板，扩增去除终止子的目的基因，但是怎么也扩增不到我的目的条带1.7kb，我的重组质粒有5.9kb左右，载体是pse380，非特异性条带为1.5kb以及2.7kb左右，后来酶切重组质粒，胶回收1.7kb得到目的基因，用这个作为模板来扩增，跑胶还是没有，在1.0kb左右很亮的条带，用的是50-60的温度梯度，大家帮帮忙，谢谢啊，如果还有疑问，我在写清楚点！ |
回复此楼» 猜你喜欢
材料与化工371求调剂
已经有9人回复
-
085600调剂
已经有9人回复
-
346分的生物与医药08600求调剂
已经有6人回复
-
304求调剂（085602，过四级，一志愿985）
已经有13人回复
-
328分调剂
已经有6人回复
-
求调剂
已经有9人回复
-
358求调剂
已经有7人回复
-
生物与医药调剂
已经有3人回复
-
367求调剂
已经有3人回复
-
工科08专硕机械275求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 1500bp全长的序列，设计引物时一般期望产物长度为多长呢？
已经有4人回复
- 【求助/交流】长片段PCR
已经有10人回复
- 【求助/交流】为什么我反转录PCR的抗体的轻链基因测序后发现总是有终止子？
已经有6人回复
- 【求助/交流】5-RACE问题
已经有14人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
- 浙江大学2006年分子生物学考博
已经有8人回复
2楼2011-10-30 20:53:20
gongeleven
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 7107.8
- 散金: 222
- 红花: 3
- 帖子: 432
- 在线: 152.9小时
- 虫号: 1082982
- 注册: 2010-08-27
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2011-10-31 00:05:04
huguangdong
至尊木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 68 (初中生)
- 金币: 10532.4
- 散金: 858
- 红花: 102
- 帖子: 4271
- 在线: 1581.2小时
- 虫号: 1009663
- 注册: 2010-05-01
- 专业: 畜牧学
4楼2011-10-31 10:29:48
mascotte
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1998.9
- 红花: 3
- 帖子: 328
- 在线: 193.4小时
- 虫号: 492008
- 注册: 2008-01-07
- 专业: 生物化学
5楼2011-10-31 11:13:28
