应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么我反转录PCR的抗体的轻链基因测序后发现总是有终止子？
71/1返回列表
查看: 2112  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yangwuyi2003

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么我反转录PCR的抗体的轻链基因测序后发现总是有终止子？ 已有6人参与

想请教各位虫友，我的杂交瘤细胞提取总RNA后反转录PCR再用引物扩增出来的轻链基因经测序后发现总是有终止子？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-14 23:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zplipeng

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yangwuyi2003 at 2010-09-14 23:51:30:
想请教各位虫友，我的杂交瘤细胞提取总RNA后反转录PCR再用引物扩增出来的轻链基因经测序后发现总是有终止子？

终止子在两个引物内部吗？我扩增出的序列六个阅读框中有一个是没有终止密码子的。有时候可能是测序的问题。 长交流
赞一下(1人) 回复此楼
加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
2楼2010-09-15 09:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
“总RNA”？我觉得应该提mRNA吧！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-09-15 12:00:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lliu

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-15 23:26:50
引用回帖:
Originally posted by yangwuyi2003 at 2010-09-14 23:51:30:
想请教各位虫友，我的杂交瘤细胞提取总RNA后反转录PCR再用引物扩增出来的轻链基因经测序后发现总是有终止子？

你扩增的是杂交瘤细胞中SP2 融合细胞本身的Aberrant light chain，而不是被融合的B-细胞的light chain。如果我没有记错，这个终止密码应该在VK4的JK区附近。所以，你还要继续努力哟。

杂交瘤的Aberrant light chain 是影响抗体测序的一个主要问题，你可以查查文献了解细节。如果你的引物设计的足够好，建议你多测几个克隆，这用你就有机会碰到你所需的light chain。祝你好运。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-09-15 15:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

教洋文

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问虫友解决测序的问题了吗

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2018-01-06 10:06:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

924073140

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，这个问题怎么解决的？
赞一下 回复此楼
6楼2018-12-19 17:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zw破风

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
TA克隆后的测序？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2018-12-19 21:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangwuyi2003 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 东南大学364求调剂 +4 JasonYuiui 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:36 by Linda Hu
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +8 不知道叫什么！ 2026-03-15 9/450 2026-03-16 07:45 by L135790
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 求调剂 +5 鹤遨予卿 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:44 by JourneyLucky
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 材料调剂，307分 +13 张泳铭1 2026-03-09 17/850 2026-03-13 11:09 by 薛云鹏
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +4 薛云鹏 2026-03-13 4/200 2026-03-13 10:40 by 学员8dgXkO
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[基金申请] 提交后的基金本子，已让学校撤回了，可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭