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a411478332

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR:关于EB的问题!

直入主题:
1. PCR电泳步骤以后要染色,这个浓度要配成多少的EB染色最好?
2. 别的实验室有是在制胶过程中染色的,100ml的胶+用枪头沾一点EB(浓度我不知道,应该蛮高的)混合,跑出来效果也不错~~
我现在是想用第二种方法,EB要配成多少浓度的呢??有经验可以介绍~随便说说也行 ~~重在交流~
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julin1002

新虫 (初入文坛)

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感谢参与,应助指数 +1
我们实验室用的浓度是10mg/ml.在使用时,35ml胶溶液加4ul的EB,效果很好,是在配胶的时候加的,试试吧。1%和2%的胶都加4ul.
4楼2012-06-14 09:52:11
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守望者047

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
浓度一般为10mg/ml,还是得用溴化乙锭,其他的效果比较一般,制胶的时候加入4-5微升即可,操作过程中必须全程戴口罩和手套,祝你成功!
数往者顺,知来者逆!
5楼2012-06-14 10:04:17
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普通回帖

gungunak47

铁虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还用EB呢 换花菁染料吧  EB太毒了
2楼2012-06-13 17:29:04
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hzy123321

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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a411478332: 金币+2 2012-11-27 15:18:10
通常用水配成10 mg/ml的储存液,使用浓度为0.5 μg/ml
详情参见《分子克隆实验指南》
3楼2012-06-13 17:33:02
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文也002

银虫 (小有名气)

才知道,原来实验室的EB是老师配好的哦,我们都以为是买来就这样子的呢。
6楼2012-06-14 10:10:49
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a411478332

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gungunak47 at 2012-06-13 17:29:04
还用EB呢 换花菁染料吧  EB太毒了

我去和老师提!!谢谢
7楼2012-06-14 15:40:29
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a411478332

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by julin1002 at 2012-06-14 09:52:11
我们实验室用的浓度是10mg/ml.在使用时,35ml胶溶液加4ul的EB,效果很好,是在配胶的时候加的,试试吧。1%和2%的胶都加4ul.

这个详细!!!谢谢!!!
8楼2012-06-14 15:43:36
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a411478332

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 守望者047 at 2012-06-14 10:04:17
浓度一般为10mg/ml,还是得用溴化乙锭,其他的效果比较一般,制胶的时候加入4-5微升即可,操作过程中必须全程戴口罩和手套,祝你成功!

谢谢~我一直没带口罩,看样子还是要为自己负责啊,以后都要带口罩了~~
9楼2012-06-14 15:46:30
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scyxk

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
4sgreen 染料 可以用来替代eb,和你们的凝胶成像系统有关系
10楼2012-06-14 16:24:23
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