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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR非特异性条带
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hsingyu at 2012-07-28 10:20:20
我已经比上一次PCR用的退火温度提高了几度还是没办法消除非特异性条带，减少退火时间有用吗？我退火设的是20s...

不知道你用的哪种聚合酶？
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11楼2012-07-28 14:22:56
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hsingyu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by joan198108 at 2012-07-28 14:22:56
不知道你用的哪种聚合酶？...

用的是TAKARA的taq酶
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做最好的自己~
12楼2012-07-28 15:18:56
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by hsingyu at 2012-07-28 15:18:56
用的是TAKARA的taq酶...

这样退火时间就不能再短了。只能考虑其他情况了。
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13楼2012-07-28 16:31:35
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这是由于各组引物的GC含量值不同。出现特异性条带是因为退火温度低了。
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14楼2012-07-28 19:24:39
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不是一样的引物，你可以各自去扩增，可能条件不适合于所有的引物
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15楼2012-07-28 21:12:25
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hiker1989

银虫 (小有名气)
我也出现过类似问题，不知出现的条带清晰不？我认为是不是有的引物不能与模板结合，不能复制DNA，，探讨一下
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hehhe
16楼2012-09-02 16:33:38
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