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hupeng

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】有引物二聚体、非特异性扩增带是怎么回事?已有8人参与

请问一下各位大虾:
    我pcr反应后出现引物二聚体和多条非特异性扩增带,怎样解决呢?
    还有我目的片段只有87bp,怎样才能跑出一个比较好的结果。
    注:
         pcr反应液:taq酶(5U/μL)  0.2μL
                            10*pcr buffer      2.5μL
                            dNTP                   2μL
                            模板DNA              1.25μL
                            引物1                   1μL
                            引物2                    1μL
                            灭菌水                 up to 25μL
        pcr反应条件:94℃                 50sec
                              54℃                  30sec      (Tm值52℃)
                              72℃                  20sec       共35个循环
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智者务其实,愚者争其名!
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jiangzhiang

铁杆木虫 (正式写手)


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hupeng

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木虫 (正式写手)


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