应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】溶解曲线法及电泳法检查引物二聚体的差异
141/2返回列表12下一页
查看: 2460  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wdy0330

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】溶解曲线法及电泳法检查引物二聚体的差异 已有7人参与

本人在SYBR Green荧光定量PCR结束后做溶解曲线分析，曲线显示未见非特异条带峰，也不存在引物二聚体的峰，但是上述产物电泳时却发现在引物大小位置存在弱条带，这条带是引物二聚体还是引物单链？不知该如何解释？
下图为溶解曲线图：

下图(左面两条带)为电泳图，大小为95bp，凝胶使用Gel Red染色：


[ Last edited by wdy0330 on 2010-9-17 at 17:51 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-17 16:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般来说real time PCR结果很权威了啊，建议重做看看。一般产物也是引物二聚体的位置啊，你的目的带很明显的跟你认为的不明带区分吗，目的产物多大啊？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-09-17 17:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdy0330

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2010-09-17 17:37:26:
一般来说real time PCR结果很权威了啊，建议重做看看。一般产物也是引物二聚体的位置啊，你的目的带很明显的跟你认为的不明带区分吗，目的产物多大啊？

具体情况如图所示
赞一下 回复此楼
3楼2010-09-18 14:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare:的确如此 2010-09-19 12:17:49
silicare(金币+2):忘加分了~ 2010-09-19 12:19:04
这个峰型不是很漂亮，不像“犀牛角”那般锐利，可能是叠峰了，而且你看峰的前面不是很好~抬得比较高
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2010-09-18 15:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdy0330

铜虫 (初入文坛)
silicare:这和rox没关系 2010-09-19 12:18:38
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-09-18 15:06:13:
这个峰型不是很漂亮，不像“犀牛角”那般锐利，可能是叠峰了，而且你看峰的前面不是很好~抬得比较高

在做这个曲线的时候没有放置ROX来矫正，所以有点不漂亮
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-09-18 17:15:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzjlan

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wdy0330 at 2010-09-18 17:15:06:


在做这个曲线的时候没有放置ROX来矫正，所以有点不漂亮

rox只是校正孔间差异，对于你一个孔而言影响应该不大吧，而且rox的使用跟仪器有关；另外看那条带亮度应该是引物二聚体，可惜没放Marker。如有错误请各位大虾指出
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-09-18 19:27:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdy0330

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by hzjlan at 2010-09-18 19:27:06:

rox只是校正孔间差异，对于你一个孔而言影响应该不大吧，而且rox的使用跟仪器有关；另外看那条带亮度应该是引物二聚体，可惜没放Marker。如有错误请各位大虾指出

左面两条泳道上面的条带为目的条带，下面的欠模糊的为引物二聚体
赞一下 回复此楼
7楼2010-09-19 09:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的溶解曲线不是特别漂亮，看你电泳图要么是扩增的循环数太多了，要么是上样量太大了，如果循环数太多了也容易增加引物二聚体的扩增可能，总之这对引物不是特别的好，首先是可以换一对引物试试，如果不想换引物那可以降低引物浓度，减少循环数再看看，如果得到改善也可以继续使用。Rox跟你这问题不搭嘎的。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-09-19 10:37:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是引物放的多，那时引物的条带，而不是引物二聚体。
赞一下(1人) 回复此楼
供应PCR增量剂
9楼2010-09-19 11:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdy0330

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by bigboy123 at 2010-09-19 11:22:43:
是不是引物放的多，那时引物的条带，而不是引物二聚体。

对  我倾向于这种观点，下面的是引物单链，而不是二聚体，不知对否？
赞一下 回复此楼
10楼2010-09-19 12:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wdy0330 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考研] 中科院材料273求调剂 +3 yzydy 2026-03-15 3/150 2026-03-15 21:15 by ms629
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考博] 欢迎申博同学联系 +3 天道酬勤2026686 2026-03-10 7/350 2026-03-15 19:03 by 天道酬勤2026686
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +3 腻腻gk 2026-03-14 3/150 2026-03-15 17:28 by 小物理化学
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 332分材料工程调剂 +3 莓好时光海苔 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:03 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
[考研] 327分求调剂086 +4 西红柿?小帅 2026-03-09 7/350 2026-03-10 14:47 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭