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【求助/交流】关于荧光定量PCR的小问题,请高手指点 【问题已解决】
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使用百泰克的荧光定量PCR mix做定量,结束后没有做溶解曲线,而是走琼脂糖胶电泳确认效果. DNA是新提取的,质量可以保证. 第一次做的还可以,目的条带比较亮,NTC没有条带.几乎没有拖尾弥散现象.NTC下排后三个泳道.如图1 但过一段时间以后,同样PCR的条件,同样的操作,为啥那么多非特异扩增之类的东东?条带拖尾弥散..很是恶心....NTC无目标条带,但有拖尾....NTC是倒数第二第三泳道.如图2。 请教高手,是不是我后来的PCR的体系有问题? mix?水?有问题? 溶解引物和定容的水师天跟的无酶水,mix是新买的,应该都不会出问题呀? 请高手赐教! [ Last edited by 在雨中 on 2010-12-9 at 13:07 ] |
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