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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR新手求助分析溶解曲线
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Axililiy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR新手求助分析溶解曲线 已有4人参与

图一：

图二：
我是做绝对定量的，这是标准品的溶解曲线，请大家帮忙分析一下为啥出现两个峰呢？谢谢~
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1楼 2010-08-13 19:21:33
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-08-13 20:27:54
两个图是代表两份不同的标准品吗？
第一个勉强ok，不是那么干净漂亮
第二个不行……
你这里的标准品代表什么意思呢？
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-13 19:36:07
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Axililiy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-13 19:36:07:
两个图是代表两份不同的标准品吗？
第一个勉强ok，不是那么干净漂亮
第二个不行……
你这里的标准品代表什么意思呢？

是两种不同的标准品，就是标准质粒
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-13 19:52:40
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芥末蚕豆

铜虫 (初入文坛)
★
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最主要的问题是：为什么主峰会错位啊？
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开心就好！
4楼2010-08-13 19:58:19
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-08-13 21:11:12
照图推测应该是梯度稀释的质粒吧~
我的个人感觉是，第一个图，有一个峰错位，可能是意外……一般实时定量还是要设3个复孔，不然有时候出现一点“意外”都说不清楚的
第二个图，我认为或许换一下引物以及略微调整退火温度会好些
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-08-13 20:38:35
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jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先常规pcr看看条带是不是单一，尤其是第二张图的样品
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6楼2010-08-14 10:37:10
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