[交流] 【求助/交流】今天做的Rea Time PCR怎么看不到融解曲线？是不是前面设置出现了问题？

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-17 18:48:43:
7300的机器没用过，不过你确定Stage 3那里有设连续读取荧光吗？

Originally posted by dovekaoyan at 2010-12-17 19:01:50:



现在我设的是在Stage 2那里连续读取，你说的跟Data Collection 是不是一个意思a

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-17 19:07:32:


stage 3当然也要读了，是在升温的step读
因为我没用过7300所以没也办法直接解释

简单而言，前面的扩增定量阶段，是所谓的点读取，就是在延伸的最后一刻读取一个值即可

而melting curve的话，是在复性后 ...

Originally posted by dovekaoyan at 2010-12-17 19:17:40:


但是好像不能设置两个data collection 点，我第一次是选择在stage 3结果看不到扩增曲线

Originally posted by yydopcr at 2010-12-18 13:18:24:
7300用过，不过好像你那个第三步是你自己设置的吧，没有读荧光，这个是不对的。你可以直接用add dissociation stage, 如果我没有记错的话会直接显示dissociation stage， 而不是stage 3。

[ Last edited by y ...