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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Real-time PCR
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】Real-time PCR 已有2人参与

实验室新到ABI 7500fast 实时荧光定量PCR仪一台，小试了一下SYBR法，仅为定性。下面是溶解曲线等图谱，对这方面的理论知识比较欠缺，所以不知道出现的非特异扩增该怎么消除，是不是非得重新设计引物呢。哦，一共三管，一管为空白，另两管为阳性平行样。麻烦大家指导指导哈



[ Last edited by lhm_hnyj on 2011-1-17 at 12:22 ]
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1楼 2011-01-17 12:19:41
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love_st

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的Ct值在30左右的那个是空白么？
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2楼2011-01-17 12:27:06
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by love_st at 2011-01-17 12:27:06:
你的Ct值在30左右的那个是空白么？

恩，对的
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3楼2011-01-17 12:30:21
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love_st

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by lhm_hnyj at 2011-01-17 12:30:21:

恩，对的

那非特异性扩增还是蛮严重的，注意引物设计的特异性，不行用探针法试试
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4楼2011-01-17 12:39:04
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by love_st at 2011-01-17 12:39:04:

那非特异性扩增还是蛮严重的，注意引物设计的特异性，不行用探针法试试

就是对引物设计这块不太在行，按文献上合成的。如果作为正式数据，应该只有单峰才好吧。不过培训时都说用于真伪鉴定有非特异扩增也没关系。似乎很难跟人解释清楚哦
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5楼2011-01-17 12:42:53
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