| 查看: 4534 | 回复: 19 | ||
[求助]
qPCR总出现非特异性扩增，到底是怎么回事？
|
||
|
1. 我提取了两个样品的RNA，然后反转录为cDNA； 2. 通过普通的PCR检测引物和cDNA情况，显示特异性很好，单带，如下图： 3. 我在qPCR的时候扩增曲线的重复性还是不错的，但是溶解曲线就不好了，总是有个小峰，就是所谓的非特异性扩增吧，几乎所有的靶标都是这样的，actin内参也是的，但这个内参，我原来用也可以啊，没这种情况；难道这是模板的问题，但我的普通PCR扩增的还挺好的啊； 请大家帮我分析下什么原因，和qPCR的设置我想没太大的关系吧。  普通PCR  溶解曲线  让我伤心的1 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有247人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR出现非特异性扩增，求高手解答
已经有9人回复
- 菌落PCR出现非特异性扩增，测序峰图出现套峰
已经有5人回复
- 连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增
已经有5人回复
- RT后扩增到的条带出现非特异性，该如何处理
已经有4人回复
- PCR非特异性扩增
已经有6人回复
- 【求助/交流】有引物二聚体、非特异性扩增带是怎么回事？
已经有10人回复
henryxue
木虫 (小有名气)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 6043.7
- 红花: 1
- 帖子: 92
- 在线: 76.1小时
- 虫号: 2009319
- 注册: 2012-09-18
- 专业: 免疫生物学
3楼2012-12-12 21:06:34
chenguestc
木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 576 (博士)
- 贵宾: 0.4
- 金币: 4526.9
- 散金: 1639
- 红花: 176
- 帖子: 4708
- 在线: 353.5小时
- 虫号: 1337860
- 注册: 2011-07-05
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
11楼2012-12-13 09:54:55
2楼2012-12-12 16:45:58
4楼2012-12-13 00:27:56
luobugou
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 4387.8
- 散金: 14
- 红花: 4
- 帖子: 346
- 在线: 87.7小时
- 虫号: 975172
- 注册: 2010-03-18
- 专业: 糖尿病
5楼2012-12-13 03:48:00
6楼2012-12-13 04:20:06
7楼2012-12-13 08:46:21
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
8楼2012-12-13 08:52:05
9楼2012-12-13 08:52:38
henryxue
木虫 (小有名气)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 6043.7
- 红花: 1
- 帖子: 92
- 在线: 76.1小时
- 虫号: 2009319
- 注册: 2012-09-18
- 专业: 免疫生物学
10楼2012-12-13 08:58:11
