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doubleping新虫 (小有名气)
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V3区pcr出现非特异性条带怎么办?
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我用16S的pcr产物扩增V3区,目的片段在250bp左右,但是我扩增出来出现了四条很淡的非特异性条带,大小在1400-300bp之间,不明白这是为什么?给位大神给点意见吧!!!! 我使用体系是2*taq mastermix 15ul,引物 10um/ml 各1ul,模版1ul,ddH2O 12ul,总共30ul,程序是touchdownPCR程序,枪头和水、离心管都是高温灭菌过的,不过没有在超净台和冰上操作。 |
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