24小时热门版块排行榜    

查看: 4709  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xianglixie3

铜虫 (小有名气)

[求助] pcr扩增后 电泳后条带不对 请大侠帮忙! 已有3人参与

下面是我的电泳图   红框里是我的问题条带 基因原长是2900BP左右
PCR模板 是连了T载体的质粒
酶切是可以获得目的基因的 就是 红框后面的酶切条带
但是pCR得不到目的条带
我重新提取了野生型的DNA 也没有扩增出目的条带
我用的酶有primier start  普通TAQ也没有。。。
求解!!!!!!!!!!!!!!1

pcr扩增后 电泳后条带不对 请大侠帮忙!
2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg


pcr扩增后 电泳后条带不对 请大侠帮忙!-1
2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xianglixie3

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hg30717580 at 2015-07-10 16:22:27
把你的模板质粒稀释下作为模板 再PCR扩增下试试看。

我稀释过 10 50 倍就没有带了
10楼2015-07-13 11:42:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-10 21:06:29
你说的问题条带是什么意思?是你的目的条带吗?2900bp也不算长啊,引物模板退火温度都是要考虑的,质粒作为模板扩增也很常见,应该不会有问题吧(你自己看看)引物也得你自己验证了,,可以使用hot start taq酶扩增试试看,改用热启动PCR的方法,高保真酶可能会让模板降解吧
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-07-10 10:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xianglixie3

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-07-10 10:11:44
你说的问题条带是什么意思?是你的目的条带吗?2900bp也不算长啊,引物模板退火温度都是要考虑的,质粒作为模板扩增也很常见,应该不会有问题吧(你自己看看)引物也得你自己验证了,,可以使用hot start taq酶扩增 ...

我的问题是我做了PCR 但是条带看上去不是质粒吗 就像质粒自己跑的电泳 没有经过PCR
3楼2015-07-10 10:52:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by xianglixie3 at 2015-07-10 10:52:45
我的问题是我做了PCR 但是条带看上去不是质粒吗 就像质粒自己跑的电泳 没有经过PCR...

。。。什么 问题,我竟无言以对
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-07-10 10:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 13:44 by winsaint
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 5/250 2026-08-28 12:41 by Tide man
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +12 晴天加油 2026-08-26 13/650 2026-08-28 11:32 by skyjudy
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +10 Kittylucky 2026-08-27 11/550 2026-08-28 10:45 by Kittylucky
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金不中,共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见