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xianglixie3铜虫 (小有名气)
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pcr扩增后 电泳后条带不对 请大侠帮忙!已有3人参与
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下面是我的电泳图 红框里是我的问题条带 基因原长是2900BP左右 PCR模板 是连了T载体的质粒 酶切是可以获得目的基因的 就是 红框后面的酶切条带 但是pCR得不到目的条带 我重新提取了野生型的DNA 也没有扩增出目的条带 我用的酶有primier start 普通TAQ也没有。。。 求解！！！！！！！！！！！！！！1   2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg  2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg |
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【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-10 21:06:29
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-10 21:06:29
| 你说的问题条带是什么意思？是你的目的条带吗？2900bp也不算长啊，引物模板退火温度都是要考虑的，质粒作为模板扩增也很常见，应该不会有问题吧（你自己看看）引物也得你自己验证了，，可以使用hot start taq酶扩增试试看，改用热启动PCR的方法，高保真酶可能会让模板降解吧 |
2楼2015-07-10 10:11:44
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4楼2015-07-10 10:54:44
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7楼2015-07-10 17:00:24