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赵建雪

银虫 (正式写手)

[求助] PCR后电泳出现一片亮色，那些亮的东西是什么？

PCR后电泳出现一片亮色，那些亮的东西是什么？
PCR后电泳出现一片亮色，那些亮的东西是什么？
w133h1225636_1371957248_714.jpg
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自己的路只有自己能负责
1楼 2013-06-22 20:29:44
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回帖置顶 ( 共有3个 )

赵建雪

银虫 (正式写手)
1949stone: 回帖置顶 2013-06-24 08:01:42
引用回帖:
2楼: Originally posted by wencheng1109 at 2013-06-23 00:14:03
图呢？发张你跑的电泳图看看，不然怎么知道你的亮指的是什么？

当时传图片了，不知怎么没有了
PCR后电泳出现一片亮色，那些亮的东西是什么？-1
IMG_20130622_162837.jpg
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自己的路只有自己能负责
4楼2013-06-23 11:14:13
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赵建雪

银虫 (正式写手)
1949stone: 回帖置顶 2013-06-24 08:01:45
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-23 01:21:52
亮色出现在什么位置？无图无真相啊。

整个泳道都是亮的，
PCR后电泳出现一片亮色，那些亮的东西是什么？-2
IMG_20130622_162837.jpg
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自己的路只有自己能负责
5楼2013-06-23 11:15:36
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-06-26 12:40:57
gyesang: 回帖置顶 2013-06-26 12:41:22
1.可能是出现片状拖带或涂抹带：PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：(1)减少酶量，或调换另一来源的酶。(2)减少dNTP的浓度。(3)适当降低Mg2+浓 度。(4)增加模板量，减少循环次数。
2.操作过程中发生了污染。
3.DNA模板本身就不纯，应该重新提纯模板。

三条意见仅供参考！
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18楼2013-06-24 23:23:22
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普通回帖

wencheng1109

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
图呢？发张你跑的电泳图看看，不然怎么知道你的亮指的是什么？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-06-23 00:14:03
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
亮色出现在什么位置？无图无真相啊。
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3楼2013-06-23 01:21:52
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冰风颤木

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-26 12:40:02
1、楼主你的条带完全糊了，什么清楚的条带都看不见；
2、楼主你应该用专门的成像仪拍照啊；
3、一般PCR后都是单一的条带 你的不是啊。。。你的PCR体系对吗 仔细看看如何PCR
最后祝你好运！
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船到桥头自然直
6楼2013-06-23 15:49:04
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
赵建雪(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-26 12:40:18
最左边的是marker吗？如果是，marker也是模糊一片的，说明胶或者成像有问题。
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7楼2013-06-23 23:11:59
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wencheng1109

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-26 12:40:11
你的marker也是一篇模糊，说明是胶的问题，胶是现做的还是以前做的，如果marker能分开出现这种可能模板量过多，但你的marker也这样，只能是胶的问题。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2013-06-24 00:27:34
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丸子龙

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
赵建雪(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-26 12:40:26
很可能是胶本身的原因，因为你的Marker条带也弥散了。不知道你胶的浓度是多大，我一般做1%的。
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9楼2013-06-24 08:02:17
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langduiyue

银虫 (小有名气)
降解 or 污染，   多少给个 阳性 和 阴性， 要不然谁说的清楚
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角逐自我
10楼2013-06-24 10:47:25
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