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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR后电泳出现一片亮色，那些亮的东西是什么？
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金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
赵建雪(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-26 12:40:47
胶配的不好，marker不清楚，你那可能是非特异性扩增
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★穷则独善其身,达则兼济天下★
11楼2013-06-24 11:41:05
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赵建雪

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰风颤木 at 2013-06-23 15:49:04
1、楼主你的条带完全糊了，什么清楚的条带都看不见；
2、楼主你应该用专门的成像仪拍照啊；
3、一般PCR后都是单一的条带 你的不是啊。。。你的PCR体系对吗 仔细看看如何PCR
最后祝你好运！

本来就什么条带都没有呀，只有一片亮
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自己的路只有自己能负责
12楼2013-06-24 12:23:26
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赵建雪

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-23 23:11:59
最左边的是marker吗？如果是，marker也是模糊一片的，说明胶或者成像有问题。

没有点MARK，用过的一次胶，第一次mark挺好的
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自己的路只有自己能负责
13楼2013-06-24 12:24:34
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赵建雪

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wencheng1109 at 2013-06-24 00:27:34
你的marker也是一篇模糊，说明是胶的问题，胶是现做的还是以前做的，如果marker能分开出现这种可能模板量过多，但你的marker也这样，只能是胶的问题。

mark第一次用的时候很好，这次没跑，模版我做了梯度，结果还是完全一样，
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自己的路只有自己能负责
14楼2013-06-24 12:25:50
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赵建雪

银虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 丸子龙 at 2013-06-24 08:02:17
很可能是胶本身的原因，因为你的Marker条带也弥散了。不知道你胶的浓度是多大，我一般做1%的。

没跑mark，胶的浓度是1%
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自己的路只有自己能负责
15楼2013-06-24 12:26:52
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赵建雪

银虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by langduiyue at 2013-06-24 10:47:25
降解 or 污染，   多少给个 阳性 和 阴性， 要不然谁说的清楚

没做过阳性或者阴性对照
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自己的路只有自己能负责
16楼2013-06-24 12:27:16
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by 赵建雪 at 2013-06-24 12:24:34
没有点MARK，用过的一次胶，第一次mark挺好的...

重新配下胶跑同样的样品看看。还有就是每次都最好跑marker.
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17楼2013-06-24 23:08:59
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-06-26 12:40:57
gyesang: 回帖置顶 2013-06-26 12:41:22
1.可能是出现片状拖带或涂抹带：PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：(1)减少酶量，或调换另一来源的酶。(2)减少dNTP的浓度。(3)适当降低Mg2+浓 度。(4)增加模板量，减少循环次数。
2.操作过程中发生了污染。
3.DNA模板本身就不纯，应该重新提纯模板。

三条意见仅供参考！
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18楼2013-06-24 23:23:22
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

如果是出现假阳性，即出现扩增带不至于成为地毯样。
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19楼2013-06-24 23:24:58
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mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的胶确实是用缓冲液配的吗？记得有一次拿成蒸馏水配胶，就是这个效果...
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20楼2013-06-25 09:19:02
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