应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR电泳图怎么会这样？各位帮忙分析一下吧
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
131/2返回列表12下一页
查看: 2946  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

天yi

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR电泳图怎么会这样？各位帮忙分析一下吧

PCR电泳图怎么会这样？各位帮忙分析一下吧，多谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-05 22:27:25
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shuangzi8761

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

天yi(金币+2): 2011-12-06 12:35:51
1.你的DNA模板问题：纯度不够，有RNA污染，拖尾的那些就是。解决方法在模板中加人适量RNase.
2.引物间形成引物二聚体：在你图的最上方那些模糊成团的就是。解决方法可以将一对引物用MNAMAN上面比下，看是否会有引物二聚体情况。
3.可根据PCR原理，提高退火温度，一般2-3度；增加Taq酶量，多加0.5倍；减少循环数，28~30cycle足够。
4.建议楼主换下M，从图上看你的目的带（最下面那些），比你M最大标量还大。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-12-06 09:40:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

A406

新虫 (初入文坛)
个人觉得首先你要确定你的实验目的，不同目的实验要求也不同，其次确认模板是否符合你的PCR，鉴定的话模板纯度不够也可以，只要能有一定亮度的PCR条带，第三，明确你的目的条带电泳是在什么位置，PCR程序是否正确，引物是否有问题（做个阳性对照），二聚体是会影响条带亮度，但要是如果实验没有很高要求，比如鉴定，存在二聚体也没关系。
如果想通过PCR获得目的基因，那就在目的基因上下取二十多碱基作为引物（不用软件设计），只要电泳条带无杂带，大小合适，测序结果正常就OK，不行就换对引物呗，或者刚开始多合成几对引物，现在合成引物及测序也很便宜很快。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-12-06 12:56:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

情系石河子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
天yi: 金币+1 2012-05-13 12:27:38
建议从下面几个方面考虑：
1.DNA模板
2.PCR条件
3.引物设计是否合理
赞一下(1人) 回复此楼
吃地苦中苦，方为人上人
8楼2011-12-07 09:37:50
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

天yi(金币+1): 2011-12-06 08:08:38
DNA 模板可能纯度不够，杂质干扰。
赞一下 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-12-06 01:00:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

籽沐

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

天yi(金币+1): 2011-12-06 12:28:51
用不含DNA酶的RNA酶处理一下，后面拖尾的亮的可能是RNA
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-06 09:26:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2011-12-06 09:29:00
已阅   申请MolEPI   编辑   查看我的主页

cgspider

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
天yi: 金币+1 2012-05-09 19:45:27
总DNA咩？

后面很亮的可能是RNA，另外，也可能是因为加太多了。。
赞一下 回复此楼
你的能力撑不起你的野心
7楼2011-12-06 16:54:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
天yi: 金币+1 2012-05-09 19:45:41
看你的marker，觉得电泳时间不够，胶好像也没融好，所以有些歪，另外，可以把胶浓度加大一些，条带会细而亮。
赞一下 回复此楼
9楼2011-12-07 11:00:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

329181203lin

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 陈年芬芳 at 2011-12-07 11:00:39:
看你的marker，觉得电泳时间不够，胶好像也没融好，所以有些歪，另外，可以把胶浓度加大一些，条带会细而亮。

胶浓度是指？
回复此楼
10楼2012-05-08 21:14:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天yi 的主题更新
131/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298分 070300求调剂 +14 zwen03 2026-04-02 14/700 2026-04-05 11:11 by a8144223
[考研] 0703调剂 +11 拾玖壹 2026-04-04 12/600 2026-04-05 10:29 by 果冻大王
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 本科211，专业085404，293分请求调剂 +5 莲菜就是藕吧 2026-04-04 5/250 2026-04-04 14:08 by 这是一个无聊的�
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 求材料调剂，一志愿郑州大学289分 +15 硕星赴 2026-04-03 15/750 2026-04-04 01:01 by userper
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +19 bradoner 2026-04-01 23/1150 2026-04-03 10:07 by linyelide
[考研] 求调剂，一志愿南京师范大学计算机专硕，初试373，六级通过， +3 计算机追梦人 2026-04-01 3/150 2026-04-02 07:57 by fxue1114
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +8 月照花林。 2026-04-01 8/400 2026-04-01 22:08 by 无际的草原
[考研] 070300化学279求调剂 +15 哈哈哈^_^ 2026-03-31 17/850 2026-04-01 21:37 by 给你你注意休息
[考研] 085600，320分求调剂 +5 大馋小子 2026-04-01 6/300 2026-04-01 19:40 by 唐沐儿
[考研] 0703一志愿南师大334求调剂 +4 seven7yu 2026-03-30 4/200 2026-04-01 16:10 by oooqiao
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
[考研] 0710生物学求调剂！ +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 本科211总分289，08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭