应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA电泳图，奇怪的条带，大家帮我解解惑分析下吧
81/1返回列表
查看: 5212  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

紫米粥

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA电泳图，奇怪的条带，大家帮我解解惑分析下吧


RNA从肝脏中提取，共有两只动物的。从左到右依次是：1号动物目的基因（380bp---PRPS）四个温度，1号动物内参（299bp----Mgapdh）四个温度，2号动物目的基因（380bp---PRPS）四个温度，100bp DNA ladder ，2号动物内参（299bp----Mgapdh）四个温度。电泳条件：100v，40min。
内参跑得比较猥琐。。。。目的基因在100bp有条带是蛋白质污染么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-03 20:02:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫米粥

新虫 (初入文坛)
1949stone: maker很委屈啊 2011-11-03 22:12:20
是maker跑得比较猥琐。。。
赞一下(3人) 回复此楼
2楼2011-11-03 20:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子

【答案】应助回帖

是不是胶问题，应为MARKER都跑得不算很好。提高退火温度试试。或者做一个梯度PCR优化退火温度。
赞一下 回复此楼
开开心心做科研，踏踏实实做好人。
3楼2011-11-03 22:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.猥琐问题：100bp Marker(100-1000bp)的DNA片段要用2%的gel来跑，那样Marker就不猥琐了。如果想跑得漂亮些，电压不要过大，6-7V/cm
2.RNA从肝脏提取？直接合一链扩的吗？100bp有条带建议去比比引物看除了目的片段还会扩出来什么。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
4楼2011-11-04 09:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫米粥

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by longrna at 2011-11-04 09:20:11:
1.猥琐问题：100bp Marker(100-1000bp)的DNA片段要用2%的gel来跑，那样Marker就不猥琐了。如果想跑得漂亮些，电压不要过大，6-7V/cm
2.RNA从肝脏提取？直接合一链扩的吗？100bp有条带建议去比比引物看除了目的片 ...

是从肝脏提取，然后用天根的cDNA第一链合成试剂盒反转。
后来把引物量和模版量都降下来了，目的片段不明显，100bp条带还是很多，怎么看引物还合成了什么片段呢？引物都在20bp左右，会不会是形成了引物四聚体。。。。还是引物设计得不好呢
赞一下 回复此楼
5楼2011-11-21 09:38:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

NEVER000

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是胶的浓度的问题，而且你的目的条带很少，是不是P的时候条件还没摸出来啊，可以考虑下引物问题
赞一下 回复此楼
6楼2011-11-21 15:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

多大浓度的胶啊，是有点猥琐，我感觉引物是不是有点问题啊，估计是有dimer吧、、、、
赞一下 回复此楼
7楼2011-11-21 16:44:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jocelyn2012

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4094429楼: Originally posted by 紫米粥 at 2011-11-21 09:38:04:
是从肝脏提取，然后用天根的cDNA第一链合成试剂盒反转。
后来把引物量和模版量都降下来了，目的片段不明显，100bp条带还是很多，怎么看引物还合成了什么片段呢？引物都在20bp左右，会不会是形成了引物四聚体。。 ...

把你的模板序列（如基因组序列）和引物用软件或是NCBI blast，看有多少个结合点
另外，若是蛋白质污染的话一般是在胶孔及附近有白带，所以应该不是蛋白污染
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-03 14:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 紫米粥 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-09 4/200 2026-03-16 01:21 by Xttdmn
[考研] 化学工程321分求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:49 by a不易
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +11 enenenhui 2026-03-13 12/600 2026-03-14 21:48 by laoshidan
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 一志愿天大化工（085600）调剂总分338 +6 蔡大美女 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:46 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 282分材料专业求调剂院校 +18 枫桥ZL 2026-03-09 25/1250 2026-03-13 10:47 by 白夜悠长
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭