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hanxf0818

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮忙看一下,好奇怪,我的电泳图,三个加样孔在分离胶合在一起了

我是筛到一个菌,发酵产酶,硫酸铵沉淀,透析,DNS检测有活性,跑电泳,电泳图如下,由于不知道是什么酶,分子量大小,目前也没有查到这方面的文献,但电泳图很奇怪,跑了几次都这样帮忙看一下谢谢了。
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家有儿女888
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励上图 2011-07-14 07:56:46
刚才图片没有传上去下面是电泳图

家有儿女888
2楼2011-07-13 23:01:34
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2011加油

银虫 (正式写手)

确实好奇怪啊
每天都是新开始,2011,要好好努力!
3楼2011-07-13 23:11:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-07-14 07:56:34
硫酸铵太多了,蛋白质会跑得很奇怪的。再说仅经过硫酸铵沉淀这一步的酶肯定也不纯的,不用跑胶,看不出大小的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-07-13 23:19:17
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)

那我应该怎么处理呢,我已经透析了3天,我没有关于这个酶的任何信息,只知道是多糖水解酶,目前来说此酶应该是胞外酶,胞内酶活性很低。
家有儿女888
5楼2011-07-14 10:35:34
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

可以用其它纯化方法一起来
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-07-14 17:52:30
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xinxing481

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-15 18:56:57
同意二楼的看法,盐浓度过高,并且硫酸铵沉淀并不能很纯的分离蛋白,可以先测几个底物试试,看是什么酶活,然后再根据底物是否能跑个活性电泳!
7楼2011-07-14 20:24:01
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)

dhd997: 如果你想告诉谁,可以引用回复,这一可以给人一个提示, 2011-07-15 18:57:40
活性电泳我跑了,有活性,但也不是条带,一片,后来又把胶割下来,用缓冲液溶解,再跑电泳,还有活性,还是不是正常的条带,跟上面一样,也是弯曲的,染色也没有条带。
这酶活性因该挺高的,固体平板上接这个菌,划线,两天就全部变成液体了。
可是这个液体跑电泳,上样100微升,也没看到条带。培养基是多糖加无机盐。
家有儿女888
8楼2011-07-15 11:35:49
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